Question

药物A是一种新型免疫调节剂，临床用于肿瘤的治疗。研究人员利用H细胞对其作用机理进行了相关研究。

（1）H细胞是一种肝癌细胞，具有________的特点，该细胞产生的根本原因是________。细胞癌变后通常会表达特异性的膜蛋白，当体内出现癌细胞时，机体主要通过________免疫发挥免疫监控和清除作用。但由于各种原因，癌细胞表面特异性抗原表达量________，无法被免疫细胞识别，从而实现免疫逃逸。

（2）将H细胞培养一段时间后，分别加入D溶剂溶解的不同浓度的药物A溶液，24h后测定细胞存活率。实验结果如下表，由数据可知药物A对H细胞无明显的细胞毒性，原因是_______________________。

浓度/µmol·L^-1	0	1	5	10	15	20
细胞存活率/%	100．0	98．21	97．85	97．12	96．87	96．24

（3）研究人员对药物A的免疫调节作用进行研究。将H细胞与T淋巴细胞按一定比例混合，分别加入不同浓度的药物A溶液，培养一段时间后统计各组癌细胞的凋亡率。对照组的设置应为________。

①单独培养的H细胞      ②单独培养的T淋巴细胞      ③混合培养的H细胞与T淋巴细胞

④加入等量的D溶剂      ⑤加入等量的生理盐水

凋亡率统计结果如下表，据此提出药物A的免疫调节作用是_______________________。

浓度/µmol·L^-1	凋亡率/%
对照组	3
1	13．4
10	29．3
15	55．3

（4）为进一步探究药物A发挥免疫调节作用的机理，研究人员又做了如下实验：

①已知IL-2、TNF-α是T细胞产生的两种杀伤性细胞因子，研究人员利用癌症模型鼠进行实验，测定了不同组小鼠IL-2、TNF-α的表达量，结果如下表：

A药剂量/mg·kg^-1	IL-2	TNF-α
0	14．12	11．25
5	18．31	16．54
10	24．32	20．23
15	31．54	27．50

②T细胞表面的PD-1和癌细胞表面的PD-L1结合后可以抑制T细胞的活性，使其无法识别癌细胞，导致癌细胞的免疫逃逸。研究者分别测定了①实验中T细胞表面的PD-1和癌细胞表面的PD-L1表达量，结果如上图。上述实验结果________（支持/不支持）药物A免疫作用机理的假设，原因是________________。

（5）请结合PD-1/PD-L1信号通路的作用机理，利用免疫学知识为治疗癌症提供一种新思路___。

Answer

无限增殖 原癌基因和抑癌基因的突变 细胞 降低或不表达 不同浓度的药物A与不加药物A处理后细胞存活率差异不明显 ③④ 药物A能促进淋巴细胞对H的杀伤能力（使癌细胞凋亡），且浓度越高杀伤能力越强 支持 药物A一方面可以增加T细胞杀伤因子IL-2、TNF-α的释放量，增强对癌细胞的杀伤作用；另一方面可通过抑制T淋巴细胞和癌细胞表面PD-1/PD-L1的表达，使T细胞活性增强，抑制癌细胞的增殖 制备抗PD-1或PD-L1单抗，抑制其活性；阻断PD-1和PD-L1的结合

【解析】

特异性免疫包括体液免疫和细胞免疫，其具体过程如下：

（1）H细胞是一种肝癌细胞，具有无限增殖的特点，该细胞产生的根本原因是原癌基因和抑癌基因突变。当体内出现癌细胞时，机体主要通过细胞免疫发挥免疫监控和清除作用。但由于各种原因，癌细胞表面抗原表达量降低，无法被免疫细胞识别，从而实现免疫逃逸。

（2）比较表中对照组以及添加不同浓度药物A处理的细胞存活率，发现不同浓度的药物A与不加药物A处理后细胞存活率差异不明显，由此推测药物A对H细胞无明显的细胞毒性。

（3）将H细胞与T淋巴细胞按一定比例混合，分别加入不同浓度的药物A溶液为实验组，那么对照组处理应是H细胞与T淋巴细胞按一定比例混合，加入等量的D溶液，故选③④。通过实验凋亡率统计结果可以看出，药物A能促进淋巴细胞对H的杀伤能力（使癌细胞凋亡），且浓度越高杀伤能力越强。

（4）通过柱形图分析可知，药物A一方面可以增加T细胞杀伤因子IL-2、TNF-α的释放量，增强对癌细胞的杀伤作用；另一方面可通过抑制T淋巴细胞和癌细胞表面PD-1/PD-L1的表达，使T细胞活性增强，抑制癌细胞的增殖，所以支持药物A免疫作用机理的假设。

（5）制备PD-1或PD-L1单抗，抑制其活性；阻断PD-1和PD-L1的结合。