Question

有些细菌可分解原油，从而消除原油泄漏造成的环境污染，某同学欲从土壤中筛选出高效降解原油的菌株，回答下列问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_______为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于__________培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有__________和平板划线法，以下关于平板划线法操作中错误的是______

A．将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红

B．将烧红的接种环在火焰旁边冷却

C．接种环在平板上划线位置是随机的

D．在挑取菌种和接种完毕后均要将试管口通过火焰

（3）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和______，无菌技术要求实验操作应在酒精灯__________附近进行，以避免环境中微生物的污染。

（4）对这些微生物的临时保藏，通常首先将菌种接种到试管的固体_______培养基上，在合适的温度下培养，菌落长成后，将试管放入______ ℃的冰箱中保藏。以后每3—6个月，都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上，原因是________________。

（5）醋酸杆菌是生产葡萄醋必用的菌种，可以从食醋中分离得到纯化的醋酸杆菌。扩大培养醋酸杆菌时，一般采用平板倒置培养，原因是_______________________________。

（6）某同学在实验室中一不小心将醋酸菌和酵母菌菌种混合在了一起，我们可以通过在培养基中加入青霉素而选择留下酵母菌，原因是______________________。

Answer

原油 选择 稀释涂布平板法 C 高压蒸汽灭菌法 火焰 斜面 4 旧培养基上的营养物质消耗和菌种代谢产物的累积不利于菌种的继续生长 防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基造成污染 青霉素能抑制肽聚糖的形成

【解析】

培养基的类型和用途

（1）按物理状态分：固体培养基和液体培养基、半固体培养基。

（2）按功能分：选择培养基和鉴别培养基。

选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。

选择培养基的制作

（1）利用培养基的特定化学成分分离特定微生物。如以石油是唯一碳源，筛选出能利用石油的微生物生长。

（2）通过改变培养基的营养成分达到分离微生物的目的。如培养基中缺乏氮源时，可筛选出固氮微生物。

（3）通过某些特殊环境分离微生物。如在高温环境中可分离得到耐高温的微生物。

（4）依据某些微生物对某种物质的抗性，在培养基中加入此种物质，以抑制对该物质不具抗性的微生物生长，而不影响对该物质具有抗性的微生物生长。如培养基中加入青霉素，可筛选出酵母菌和霉菌。

（3）按成分分：天然培养基和合成培养基。

（1）为了淘汰不能降解原油的微生物，而仅保留能降解原油的菌种，则在配制以原油作为唯一碳源的选择培养基。在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以原油为唯一碳源的固体培养基上。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法。

A、接种前需要对接种环进行灭菌处理，即将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红，A正确；

B、为了避免烧伤或烧死微生物，应将烧红的接种环在火焰旁边冷却，B正确；

C、用接种环在培养基上划线时划线位置不是随机的，每一次划线要以上一次划线末端为起点，C错误；

D、在挑取菌种和接种完毕后均要将试管口通过火焰，D正确。

故选C。

（3）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌，无菌技术要求实验操作应在酒精灯火焰附近进行，以避免环境中微生物的污染。

（4）对这些微生物的临时保藏，通常首先将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养，菌落长成后，将试管放入4℃的冰箱中保藏。由于旧培养基上的营养物质消耗和菌种代谢产物的累积不利于菌种的继续生长，因此以后每3—6个月，都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上。

（5）为了防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基造成污染，一般采用平板倒置培养。

（6）由于青霉素能够细菌细胞壁的肽聚糖的形成，从而抑制细菌的繁殖，因此我们可以通过在培养基中加入青霉素而选择留下酵母菌。