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2019 年中国科学院神经科学研究所利用 CRISPR—Cas9 基因编辑技术,...

2019 年中国科学院神经科学研究所利用 CRISPR—Cas9 基因编辑技术,成功构建了世界首例核心节律基因 BMAL1 敲除猕猴模型,并成功用基因敲除猴的体细胞通过克隆技术培育了5只克隆疾病猴,为节律紊乱相关疾病机理的研究提供了比较理想的动物模型。CRISPR—Cas9 基因编辑系统由单链向导 RNAsgRNA)和 Cas9 蛋白组成。回答下列问题:

1)科学家常用______法将 CRISPR—Cas9 基因编辑系统导入猕猴细胞,编辑系统利用 sgRNA 来识别靶基因 DNA,并引导 Cas9 蛋白剪切 DNA,使靶基因发生改变,实现基因敲除。sgRNA 能识别靶基因 DNA 的原因是______________________

2)在体外培养猕猴体细胞时,需要一定比例的 O2 CO2,故通常采用_________________________________(填实验器材),将其置于 CO2 培养箱中进行培养。所使用的培养基属于_________________________(填“合成”或“天然”)培养基,培养基除了灭菌外,还需要通过_____________________________来保证无菌无毒环境。

3)进行体细胞克隆选择去核卵母细胞作为受体细胞,可能原因是 _____________________  (答出两点)。

4)克隆猴被用于人类疾病研究与治疗中所具有的突出优点是_____________________。(答出一点)

 

显微注射 sgRNA 的碱基序列能与靶 DNA 的碱基序列发生互补结合 培养皿 松盖培养瓶 合成 添加一定量的抗生素并定期更换培养液 去核卵母细胞的体积较大,易于进行实验操作;含有较多的营养物质,可以满足早期胚胎发育的需要;含有使已经分化的细胞核恢复分裂能力的物质 亲缘关系近;克隆动物能减少个体差异的影响 【解析】 1、将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是 显微注射技术.此方法的受体细胞多是受精卵。 2、将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育成动物个体.用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 (1)将目的基因注入动物细胞常用显微注射,sgRNA本质是RNA,基因 DNA本质是DNA分子,都是由核苷酸组成的长链,遵循碱基互补配对原则,所以二者能够识别的原因是sgRNA 的碱基序列能与靶DNA的碱基序列发生互补结合。 (2)动物细胞培养可以在培养皿和松盖培养瓶中进行,将其置于 CO2 培养箱中进行培养。所用的培养基需要明确各种化学成分,所以是合成培养基,培养基需要添加一定量的抗生素(可以杀菌)并定期更换培养液来保证无菌无毒环境。 (3)去核卵母细胞的体积较大,易于进行实验操作;含有较多的营养物质,可以满足早期胚胎发育的需要;含有使已经分化的细胞核恢复分裂能力的物质,所以可以作为受体细胞。 (4)猴子与人的亲缘关系近;克隆动物能减少个体差异的影响,所以克隆猴被用于人类疾病研究与治疗。
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考点分析:
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腐乳是我国传统的发酵豆制品,已有近千年的历史。腐乳的生产过程一般分为前酵期(培菌)和后酵期(装瓶后常温条件下放置,自然发酵 3 个月),采集各时段腐乳坯样品,测定相关物质含量如图 1 所示。回答下列问题:

1)豆腐为毛霉的生长提供的基本营养物质有碳源、________________。毛霉产生的酶能将酪蛋白分解而产生透明圈,将三种纯化的毛霉菌种接种在酪蛋白培养基中得到三种单菌落甲、乙、丙,其菌落直径平均值分别为 32cm28cm29cm,菌落与透明圈一起的直径平均值分别为 37cm35cm33cm。应选择菌落__________(填“甲”、“乙”或“丙”)作为产蛋白酶活力高的毛霉候选菌。

 

2)装瓶腌制腐乳时,在接近瓶口的表面要将盐铺厚一点,原因是_________________________

卤水中的香辛料和料酒(食用酒)的作用是_________________________   

3)据图 1 分析从“白块”到“晾晒2d”,腐乳坯中游离氨基酸含量变化的最主要原因是____________________;加盐腌制(腌坯)之后,腐乳坯中的游离氨基酸含量下降的原因_____________________________(答出两点)。请预测后酵期发酵瓶中的游离氨基酸的变化是___________

 

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菠菜为雌雄异株植物,性别决定方式为 XY 型。研究发现,某菠菜种群具有耐寒和不耐寒相对性状的个体若干,相关基因独立遗传且完全显性。回答下列问题:

1)从种群中选取两对耐寒和不耐寒雌雄植株进行正反交,比较子代性状表现和比例,是否一定可以判断相关基因的显隐性?_______,为什么?_______

2)某人为组建的菠菜种群中,耐寒和不耐寒个体的雌雄比均为 1:1。让其全部耐寒植株自由交配,其子代表现型及比例为耐寒:不耐寒=15:1(相关基因用 A/aB/b……表示)。

①若该性状受两对常染色体基因控制,则这两对基因遵循_____定律,子代不耐寒个体的基因型为___________________

②若该性状只受性染色体上的一对等位基因控制(不考虑 XY 同源区段的情况),则雌性亲本中杂合子比例为_______,耐寒亲本中 Xa 基因频率为____________

③要满足上述假设,种群必须满足的条件是:不同基因组成的配子_______    ;各基因型受精卵都能发育为新个体。

 

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某地在建设池塘时,设计了如图所示的食物网,鲫鱼、鳜鱼和鲢鱼生活在不同水层。回答下列问题:

1)若将该池塘中的某种单细胞藻类接种到 1L 液体培养基中培养一段时间,调查其种群密度的常用方法是___________,若将上述培养基稀释 10 倍,把等量同种藻类重新接种在 1L培养基中,与前面的处理相比,K ________(填“增大”“不变”或“减小”)。K 值是指________

2)鲫鱼、鳜鱼和鲢鱼生活在不同水层形成垂直结构,其意义是____

。其中,鳜鱼占据了该食物网第________营养级。水蚤同化的能量部分通过自身呼吸作用以热能形式散失,还有一部分用于________,储存在自身的有机物中。

 

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关于阿尔茨海默病(AD,俗称“老年痴呆”)的发病机制,现在最流行的是 β 淀粉样蛋白()假说。该假说认为从神经元中“漏出”,在细胞外沉积,进而引起周围的神经细胞膜和线粒体膜的损伤,神经纤维缠结。回答下列问题:

1)由题意可知,可通过____的方式“漏出”神经元,会引起周围的神经元内的乙酰胆碱(兴奋性神经递质)释放量_______(填“变少”、“不变”或“变多”),从而使患者记忆出现障碍。AD 患者神经系统不兴奋与机体缺少_________激素的情况很相似。

2AD 患者伴有神经纤维缠结这一异常细胞状态,会中断兴奋传导。若缠结点在图中 d点,在下图中箭头处进行刺激,_______处(填 ab c)可检测到电位变化。

 

3AD 患者会出现大量记忆性神经元数目减少的现象,据研究是由体液中的吞噬细胞吞噬引起的,这是_____________ 免疫执行功能的结果,体现了免疫系统______________ 的功能。

4)向患者体内注射抗的抗体是治疗 AD 的方法之一,其原理是_________

 

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在玻璃温室中,研究小组分别用三种单色光对某种绿叶蔬菜进行补充光源(补光)实验,补光时间为上午 7:00-10:00,结果如图所示。回答下列问题:

1)据图分析可知,红、蓝光补光组均促进该蔬菜的生长,这部分光主要由位于叶绿体的____________上的________________吸收。

2)若黄光补光组在 9:00 时突然停止补光,则植株释放的 O2 _________,原因是__________________

3)对温室内的蔬菜持续补光半个月,持续观测叶色、叶面积和净光合速率,这三个指标中,最先发生改变的是  ____________________ 最后发生改变的是________________

4)研究发现红、蓝光补光一段时间后植株的叶绿素 a 有不同程度的增加。请提供检测方法并写出比较它们叶绿素 a 含量的实验思路 ________________________

 

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