Question

植物细胞受损后通常会释放出酚氧化酶（PPO），使无色的酚类物质氧化生成褐色的物质。请分析材料回答：

（1）植物细胞中的酚类物质与酚氧化酶在细胞质中是分隔开的，是因为细胞内具有_____系统。

（2）受损伤的马铃薯细胞内酚氧化酶和底物接触，引起马铃薯褐变。为探究温度对PPO活性的影响，实验小组进行如下实验：

步骤顺序	试管1	试管2	试管3	试管4	试管5	试管6	试管7	试管8
PPO粗提液	2mL	/	2mL	/	2mL	/	2mL	/
酚类底物	/	2mL	/	2mL	/	2mL	/	2mL
反应	混合振荡	混合振荡	混合振荡	混合振荡
温度预处理	（5min） 0℃	15℃	30℃	45℃
保温时间	5min	5min	5min	5min
记录结果	+	++++	++++	++

（注：反应底物充足；实验结果中“+”越多褐色越深）

①制备PPO粗提液时要加入pH为5.5的磷酸缓冲液，其目的是_____。

②实验步骤顺序有不妥之处，请改正：_____。

③在上述预实验的基础上，请写出进一步探究PPO最适温度的基本思路：_____。

（3）茶树叶细胞中存在多种酚类物质与酚氧化酶。绿茶制作时茶叶必须先进行_____（填“高温炒制”或“低温保存”），以防变色。红茶在加工过程中充分发挥了_____的作用，使鲜叶中茶多酚大量减少，但产生了茶黄素、茶红素等新成分，香气物质明显增加。

Answer

生物膜 提供适宜的pH，保持PPO的活性（防止pH变化对酶活性的影响）； “反应”步骤应在“温度预处理”之后 在15℃～30℃范围内设置更小的温度梯度，在相同适宜条件下重复上述实验 高温炒制 PPO

【解析】

根据实验探究目的和表格内容分析可知，该实验的自变量是温度，为保证酶在设定温度下作用，应将酶和底物先放在不同的温度条件下一段时间，再将相同温度下的酶和底物混合。根据表格数据可知，在温度为15℃和30℃条件下，PPO具有相同的活性，可以推测最适温度应位于二者之间。

（1）植物细胞中的酚类物质与酚氧化酶在细胞质中是分隔开的，是因为细胞内具有生物膜系统。

（2）①制备PPO粗提液时要加入pH为5.5的磷酸缓冲液，其目的是提供适宜的pH，保持PPO的活性。

②由于酶具有催化作用的高效性，实验中应先将酶在“温度预处理”之后再与底物混合。

③根据表格数据分析，在15℃、30℃时酶的活性较高，为进一步探究PPO最适温度，可在15℃～30℃范围内设置更小的温度梯度，在相同适宜条件下重复上述实验。

（3）茶树叶细胞中存在多种酚类物质与酚氧化酶。绿茶制作时茶叶必须先进行高温炒制，使酶失活，以防变色。红茶在加工过程中充分发挥了PPO的作用，使鲜叶中茶多酚大量减少，但产生了茶黄素、茶红素等新成分，香气物质明显增加。