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内皮素(ET)是一种多肽,它有促进血管收缩和平滑肌细胞增殖等作用。内皮素主要通过...

内皮素(ET)是一种多肽,它有促进血管收缩和平滑肌细胞增殖等作用。内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体(ETA)结合而发挥生理效应。科研人员通过构建基因的表达载体,实现ETA基因在细胞中高效表达,其过程如下(图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为CCCGGG,限制酶XhoⅠ的识别序列为CTCGAG)。请分析回答:

1)完成过程①需要的酶是______________;过程①的最后阶段要将反应体系的温度升高到95℃,其目的是使RNA链和___________链分开。

2)过程③中,限制酶XhoⅠ切割DNA,使_____________________键断开,形成目的基因的黏性末端是_____________(选填“TCGA-”或“-TCGA”)。用______种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是使目的基因定向连接到载体上(或防止目的基因和质粒自身环化)。

3)过程⑥是否成功导入,可将大肠杆菌培养在含有________________的培养基中进行筛选。

4)利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是通过荧光显微检测间接判断ETA基因能否__________

5)内皮素能刺激黑色素细胞的分化、增殖并激活酪氨酸酶的活性,从而使黑色素急剧增加。美容时可以利用注射ETA达到美白祛斑效果,这是因为ETA能与内皮素结合,减少了内皮素与黑色素细胞膜上_____________的结合,抑制了黑色素细胞的增殖和黑色素的形成。

 

逆转录酶(反转录酶) cDNA(DNA、脱氧核苷酸) 磷酸二酯 TCGA-(或-AGCT) 两(2、不同) 氨苄青霉素 表达 特异性受体(受体、内皮素受体) 【解析】 分析题图,①②③表示反转录法获得目的基因的过程,④表示构建基因表达载体,⑤表示限制酶切割质粒,⑥表示重组质粒导入受体细胞,⑦表示目的基因的检测。 (1)过程①是逆转录过程,需要逆转录酶的催化;过程①的最后阶段要将反应体系的温度升高到95℃,其目的是使RNA链和cDNA链分开。 (2)过程③中,限制酶XhoⅠ切割DNA,使得DNA中的磷酸二酯键断开,根据题意,限制酶XhoⅠ的识别序列为C↓TCGAG,则切割后形成目的基因的黏性末端是-AGCT。图中显示利用了两种限制酶切割目的基因和载体,从而获得了不同的黏性末端,可以防止目的基因和载体发生自身环化,使目的基因定向连接到载体上。 (3)据图可知,重组质粒中氨苄青霉素抗性基因完整,故要确定过程⑥是否成功导入,可依靠标记基因进行筛选,将大肠杆菌培养在含有氨苄青霉素的培养基中进行筛选。 (4)利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是通过荧光显微检测间接判断ETA基因能否表达。 (5)据题意,内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体(ETA)结合而发挥生理效应。内皮素能刺激黑色素细胞的分化、增殖并激活酪氨酸酶的活性,从而使黑色素急剧增加。美容时可以利用注射ETA达到美白祛斑效果,这是因为ETA能与内皮素结合,减少了内皮素与黑色素细胞膜上特异性受体的结合,抑制了黑色素细胞的增殖和黑色素的形成。
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下图表示哺乳动物发育过程的几个阶段,请判断下列题的叙述是否正确?

_____1)从AC的过程中有机物的含量减少。

_____2AB 时期胚胎中的细胞都是全能细胞。

_____3)胚胎移植必须使用处于BC时期的胚胎。

_____4)图示过程细胞通过有丝分裂增殖,遗传物质可能会发生改变。

 

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如图为细胞融合的示意图,请判断下列题有关叙述是否正确?

_____1)若a细胞和b细胞是植物细胞,需要先脱分化再诱导融合。

_____2a细胞和b细胞之间的融合均可用电场促融处理。

_____3c细胞的形成与ab细胞膜的流动性有关。

_____4c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因。

 

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利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如下图所示,请判断下列题有关叙述是否正确?

_____1)过程①需使用DNA聚合酶和核糖核苷酸。

_____2)过程②利用PCR扩增CarE基因需使用解旋酶和耐高温的DNA聚合酶。

_____3)过程③可用NaCl溶液处理大肠杆菌,使之成为感受态细胞。

_____4)过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞。

 

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请判断下列小题有关基因工程的相关叙述是否正确?

_______1)同种限制酶既可以切割目的基因又可以切割质粒,因此不具备专一性。  

_______2)运载体与细胞膜上的载体的化学本质相同

_______3)限制酶不能切割烟草花叶病毒的核酸。

_______4DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键。

 

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治疗性克隆是将病人的体细胞进行培养,获得的胚胎干细胞定向诱导分化成病人所需要的体细胞、组织等,以取代和修复患者已丧失功能的结构。下列叙述错误的是(   

A.治疗性克隆不以个体的出生为目标

B.胚胎干细胞只能取自于囊胚或桑椹胚

C.可使用核移植技术及胚胎培养技术获得早期胚胎

D.定向诱导分化的实质是基因人为控制下的选择性表达

 

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