Question

如图是获得转基因抗虫棉的技术流程示意图。

请回答：

（1）A→B利用的技术称为________，其中②过程需要热稳定的_______________酶才能完成。

（2）图中将目的基因导入棉花细胞需要经过③过程，该过程为构建______________，目的是 _________________________。该过程中，要将目的基因插入Ti质粒的__________中。

（3）上述流程示意图中，将目的基因导入棉花细胞所采用的方法是________________法，该方法一般__________(填“适宜”或“不适宜”)用于将目的基因导入单子叶植物。

（4）欲确定抗虫基因是否整合G的染色体DNA上，可以用________________检测。鉴定在G体内是否表达，在个体水平上需要做__________实验。如果抗虫基因导入成功，且与某条染色体的DNA整合起来，该转基因抗虫棉可视为杂合子，将该转基因抗虫棉自交一代，预计后代中抗虫植株占________。

Answer

PCR DNA聚合(Taq) 基因表达载体 使目的基因在受体细胞中稳定存在并可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用 T-DNA 农杆菌转化 不适宜 DNA分子杂交技术 抗虫接种 3/4

【解析】

基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。

（1）A→B利用的技术称为PCR，其中②过程需要热稳定的DNA聚合酶（Taq酶）才能完成。

（2）图中将目的基因导入棉花细胞需要经过③过程，该过程为构建基因表达载体（重组DNA），其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在且可以遗传给下一代，并能表达。要将目的基因插入Ti质粒的T-DNA中。

（3）上述流程示意图中，将目的基因导入棉花细胞所采用的方法是农杆菌转化法，由于农杆菌对大多数的单子叶植物没有感染作用，所以该方法一般不适宜用于将目的基因导入单子叶植物。

（4）欲确定抗虫基因是否整合G的染色体DNA上，可以用DNA分子杂交的方法进行检测。在个体水平上，可用植株G的叶子喂食虫子，即抗虫性接种实验，观察其抗虫的能力。如果抗虫基因导入成功，且已经整合到宿主细胞一条染色体的DNA上，则该转基因抗虫棉可视为杂合子Gg，将该转基因抗虫棉自交一代，根据基因分离定律，预计后代中抗虫植株G_占3/4。