Question

有机磷农药常常因过量施用带来环境污染。某同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物。回答下列问题。

（1）若需增加目的菌的浓度，需在相应的培养基中进行选择培养，培养基除了为微生物的生长、繁殖提供水和氮源外，还要提供________（答出两点）等基本营养成分；制备该培养基时应在灭菌之___________（填前或后）调整pH。

（2）将获得的等量3种待选菌种甲、乙、丙分别接种在1L含20mg有机磷的同种培养液中（其他营养物质保持充裕，条件一直适宜）。记录实验开始到有机磷被耗尽所用的时间，甲、乙、丙耗尽培养液中有机磷的时间分别为32h、45h、16h，则应选择微生物________（填甲/乙或丙）作为菌种进行后续培养，理由是_________________________________。

（3）若要测定培养液中的菌体数，既可在显微镜下用_____________直接计数，也可选用稀释涂布平板法统计活菌数目。若用稀释涂布平板法计数时，某一实验组平板上菌落平均数为46个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，请分析说明空白对照组出现菌落的可能性原因：_________________ （答出两点）。 若将40（即46—6）个/平板作为实验组菌落数的平均值进行计算，则该做法________________（填正确或不正确）。

Answer

碳源和无机盐 前 丙 丙分解等量有机磷所用时间比甲、乙少，说明丙分解有机磷的能力比甲、乙强 血细胞计数板 培养基灭菌不合格、倒平板过程被污染，培养皿灭菌不合格 不正确

【解析】

1、虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，在此基础上培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

2、为检验培养基及培养皿灭菌是否合格，可取含培养基的空白平板在适宜条件下培养，观察培养基上是否形成菌落，如果没有菌落形成则说明合格。

（1）虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。制备培养基的一般步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，若要调整pH，需在灭菌之前。

（2）分析题干实验，自变量为三种菌种不同，因变量为耗尽培养液中有机磷的时间，分析结果可知，时间越短，分解有机磷的能力越强，因此应选择微生物丙。

（3）测定培养液中的菌体数，可用血细胞计数板在显微镜下直接计数，也可用稀释涂布平板法统计菌落数目间接计数。空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，说明培养基不合格，可能的原因有培养基灭菌不合格、倒平板过程被污染，培养皿灭菌不合格等，数据结果不可信应重新实验。