Question

某科研小组重复教材“观察DNA和RNA在细胞中的分布”的实验时发现实验存在两大困难：实验效果不理想，难以出现预期颜色；实验操作步骤繁琐复杂。于是他们多次对该实验做了探索与研究，做出了相关改进（改进实验结果稳定，效果良好）

Ⅰ．实验方案：（1）材料用具：人口腔上皮细胞、载玻片、盖玻片、吸水纸、生理盐水、显微镜。

（2）染色液的配制：略（与教材相同）

（3）实验步骤：

①在洁净的载玻片上，滴一滴生理盐水；

②用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻的刮几下，把牙签上附有碎屑的一端，放在上述载玻片上的生理盐水液中涂抹几下；

③点燃酒精灯，将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干；

④用微量可调移液器吸取              染液，滴加在口腔上皮细胞上，染色3-5分钟；

⑤小心盖上盖玻片，蒸馏水脱色1-2次，用吸水纸吸去多余的水分和染液；  

⑥将制作完成的载玻片放置到显微镜下观察。先用低倍镜观察选择染色均匀、色泽                     的区域，移至视野中央，将物像调节清晰；换用高倍镜后，调节             ，直至清楚的观察到细胞核与细胞

质染色情况。    

Ⅱ．补充实验过程、完善结果

（1）实验第④步的染液是指___________________。

（2）实验第⑥步中选择染色均匀色泽________（“深”，“浅”），换用高倍镜后，调节________________。 

（3）在显微镜下会看到人口腔上皮细胞中的_______________被染成绿色，_____被染成红色，原理是________________________。

（4）依据细胞中颜色分布的不同，可得出的实验结论是___________________。

Ⅲ．将口腔上皮细胞换为洋葱鳞片叶内表皮细胞，重复上述试验，实验设计如下：（✔表示进行此项操作，空白处代表不进行此项操作）

实验操作	第1组	第2组	第3组
在洁净载玻片上滴加1滴8%HCl	✔	✔
在洁净载玻片上滴加1滴清水			✔
将一小块洋葱鳞片叶表皮置于液滴浸泡5分钟	✔	✔	✔
反复用蒸馏水清洗材料3次	✔
反复用1%NaHCO3溶液清洗材料3次		✔
用吸水纸将载玻片上液滴吸干	✔	✔	✔
滴加染液染色5分钟，在显微镜下观察染色效果	✔	✔	✔

（5）结果表明3组实验均能把细胞核染色，且染色深浅程度依次为___________，这一结果表明8%HCl能够增加活的洋葱鳞片叶表皮细胞的细胞膜通透性，但细胞中残留的HCl会影响染色剂的染色效果，且后者影响更大。

综上所述，实验中是否要用HCl处理应依据所选材料而定。若使用HCl处理，一定要注意处理时间不宜过长以免HCl进入细胞核破坏DNA结构，并及时用1%NaHCO₃溶液中和残留的HCl，从而避免细胞内残留HCl改变染色剂发挥作用的pH值。

Answer

甲基绿吡罗红混合染液 浅 细准焦螺旋 细胞核 细胞质 ，甲基绿吡罗红对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色、吡罗红使RNA呈现红色 真核细胞的DNA主要分布在细胞核，RNA主要分布在细胞质 第2组＞第3组＞第1组

【解析】

1、实验原理

①DNA主要分布于细胞核中，RNA主要分布于细胞质中；

②甲基绿和吡罗红对DNA、RNA的亲和力不同：利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布；

③盐酸（HCl）能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。

2、实验步骤：取口腔上皮细胞，水解，冲洗涂片，染色，观察。

3、结果和结论：DNA主要分布于细胞核中，RNA主要分布于细胞质中。

Ⅱ（1）观察DNA和RNA的分布用甲基绿吡罗红混合染液进行染色。

（2）先用低倍镜观察选择染色均匀、色泽浅的区域，移至视野中央，将物像调节清晰；换用高倍镜后，调节细准焦螺旋。

（3）由于甲基绿吡罗红对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色、吡罗红使RNA呈现红色，DNA主要分布在细胞核中，RNA主要分布在细胞质中，所以细胞核被染成绿色，而细胞质被染成红色。

（4）该实验说明了真核细胞的DNA主要分布在细胞核，RNA主要分布在细胞质

Ⅲ（5）根据结论“8%HCl能够增加活的洋葱鳞片叶表皮细胞的细胞膜通透性，但细胞中残留的HCl会影响染色剂的染色效果，且后者影响更大”，而NaHCO3可以中和盐酸，因此染色效果最好的是第2组，由于8%HCl影响更大，所以第1组颜色最浅，因此顺序是第2组＞第3组＞第1组。