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人体内的t-PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓,是心梗和脑血栓的急救药。...

人体内的t-PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓,是心梗和脑血栓的急救药。然而,为心梗患者注射大剂量的基因工程t-PA会诱发颅内出血,其原因在于t-PA与纤维蛋白结合的特异性不高。研究证实,将t-PA84位的半胱氨酸换成丝氨酸,能显著降低出血副作用。据此,先对天然的t-PA基因进行序列改造,然后再采取传统的基因工程方法表达该改造后的基因,可制造出性能优异的改良t-PA蛋白。(注:下图表示相关的目的基因、载体及限制酶。pCLY11为质粒,新霉素为抗生素。)

回答下列问题:

1)己知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板链碱基序列为ACA,而丝氨酸的密码子为UCU,因此改造后的基因决定第84位丝氨酸的模板链的碱基序列应设计为____

2)若t-PA改良基因的粘性末端如图所示,那么需选用限制酶________切开质粒pCLY11,才能与t-PA改良基因高效连接,在连接时需要用到 ___酶。

3)应选择____(能/不能)在加入新霉素的培养基中生存并形成菌落的大肠杆菌作为受体细胞,目的是____。在加入新霉素的培养基中形成菌落的受体细胞并非都是目的菌株,需选择呈____色的菌落,进一步培养、检测和鉴定,以选育出能生产改良t-PA蛋白的工程菌株。

4)以上制造性能优异的改良t-PA蛋白的过程称为____工程。

 

AGA XmɑⅠ BglⅡ DNA连接酶 不能 以便筛选出导入质粒pCLY1I的大肠杆菌 白 蛋白质 【解析】 基因工程的基本操作步骤:获取目的基因→构建基因表达载体→导入受体细胞→得到转基因生物→目的基因检测与鉴定。蛋白质工程可以通过基因修饰或基因合成,对现有的蛋白质进行改造,或制造新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。 (1)根据碱基互补配对的原则,丝氨酸的密码子为UCU,则其编码序列为TCT,所以模板链的碱基序列为AGA。 (2)若要质粒pCLY11与t-PA突变基因高效连接,需质粒和突变基因切割后产生黏性末端能碱基互补配对,t-PA突变基因切割后的黏性末端分别为:-GGCC和-CTAG,故质粒pCLY11需要用XmaI和Bg/II切割,连接时需要应DNA连接酶。 (3)由于质粒上以新霉素抗性基因作为标记基因,所以选择不能再加入新霉素的培养基中生存并形成菌落的大肠杆菌作为受体细胞,以便筛选出导入质粒pCLY1I的大肠杆菌。重组质粒的mlacZ序列被破坏,表达产物使细胞呈白色,故在加入新霉素的培养基中形成菌落的受体细胞需选择呈白色的菌落,进一步培养、检测和鉴定,以选育出能生产改良t-PA蛋白的工程菌株。 (4)通过对基因的改造实现对蛋白质的改造,称为蛋白质工程。
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考点分析:
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酵母菌的蛋白质可作为饲料蛋白的来源,有些酵母菌能以工业废甲醇作为碳源,研究人员拟从土壤样品中分离出可利用工业废甲醇的酵母菌,这样既能减少污染又可变废为宝。下图为主要操作流程示意图。

回答下列问题:

1)配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的____,及时对培养基进行分装,并进行高压蒸汽灭菌:在加热排除高压锅内原有的____后,将高压锅密闭,继续加热,通常在____的条件下,维持15-30min,可达到良好的灭菌效果。

2)取步骤②中梯度稀释后的适量液体加入无菌培养皿,然后将高压蒸汽灭菌后的培养基冷却至____25/50/80℃)左右时倒入培养皿混匀(步骤⑧),冷凝后将培养皿倒置,在适宜的条件下培养一段时间。

3)挑取平板中长出的单菌落,按步骤④所示进行划线纯化,下列叙述合理的是____

a.为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌

b.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量

c.划线时不能划破培养基表面,以确保能正常形成菌落

d.第二区以后的划线起始端要与上一区的划线的末端相连接,最后一区的划线末端不能与第一区的划线相连

4)步骤⑤的培养中,应加入 ___作为碳源,并加入适量的氮源、无机盐和水等成分。为监测发酵罐中酵母菌活细胞的密度,取2mL发酵液稀释1000倍后,加入等体积台盼蓝染液染色,用如图所示的计数室规格为25x16型的血细胞计数板计数,要达到每毫升4x109个活酵母菌细胞的预期密度,理论上,图中标号①~⑤五个中格里的呈____色的酵母菌细胞总数应不少于____个。

 

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果蝇的灰身(A)与黑身(a)、直毛(B)与分叉毛(b)是两对相对性状。两只雌雄果蝇杂交,F1表现型及数量如下表:

 

灰身

黑身

直毛

分叉毛

雌蝇(只)

75

26

101

0

雄蝇(只)

74

25

50

49

 

回答下列问题:

l)这两对基因的遗传遵循___ 定律。

2F1灰身直毛雌果蝇的基因型有____种,杂合子的比例为____

3)若F1中的灰身雄果蝇与黑身雌果蝇杂交,则后代中黑身果蝇所占比例为____

4)为测定F1中某只雄蝇(甲)的基因型,可将其与基因型为____果蝇测交,若后代表现型及比例为 ___,则雄果蝇(甲)的基因型为AaXBY

 

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生态专家把某一废弃池塘改造成新型池塘,并对该生态系统的营养结构和能量流动进行了调查,结果如图所示。该新型池塘生态系统中有香莲、芦蒿、多种藻类、水草,还有多种鱼类、虫类,塘边建有猪舍和蘑菇房。

回答下列问题:

1)在该池塘上发生的群落演替类型属于____;调查池塘中草鱼的种群密度,常采用的方法是______。该生态系统中的挺水植物、浮游植物、沉底植物及生活在水体中的其他生物形成了群落的____结构。

2)改造后的生态系统生物组分增多,食物网变复杂,提高了生态系统的____。写出该生态系统中营养级最多的一条食物链_____

3)该生态系统的能量来源是____。消费者的新陈代谢和分解者的分解作用,能把有机物转化成无机物,这体现了生态系统具有____的功能,图中的分解者有__________

 

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I型糖尿病表现为胰岛素依赖,II型糖尿病早期表现为胰岛素抵抗(即机体组织对胰岛素的反应不敏感)。甲乙两人禁食6小时后,服用等量一定浓度葡萄糖溶液后每隔30min检测体内血糖浓度,结果如下表。

时间/min

0

30

60

90

120

甲(血糖浓度单位: mmol/L

72

137

123

11 9

11 3

乙(血糖浓度单位: mmol/L

41

69

61

52

43

 

血糖范围参考值:

 

正常人

糖尿病人

空腹血糖浓度(单位:mmol/L

39-6 1

70

服用定量一定浓度葡萄糖溶液后2小时血糖浓度(单位: mmol/L

<78

l1 1

 

回答下列问题:

1)甲、乙两人可能患糖尿病的是____;判断的理由是 ____

2)下列因素可促进正常人体内胰岛B细胞分泌作用增强的是____(填序号)

①血糖浓度升高    ②胰高血糖素分泌增加    ③血糖浓度降低

31型糖尿病患者血液中某些抗体会损伤自身的某些胰岛B细胞,这类疾病属于____II型糖尿病早期患者体内胰岛素含量 ___(偏高/偏低/正常),对这类患者____(能/不能)采用注射胰岛素的方法进行治疗。

 

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在充满N2CO2的密闭容器中,用水培法栽培某种植物。测得植株的呼吸速率和总光合速率变化曲线如图所示(实验过程中温度保持适宜且CO2充足。横轴表示实验所用的时间)。回答下列问题:

1)第5--7 h呼吸作用加快的主要原因是____;第9--10h光合速率迅速下降,推测最可能发生变化的环境因素是____________

2)与第8h相比,第10h时不再产生ATP的细胞器是____;若此环境因素维持不变,容器内的O2含量将逐渐下降并完全耗尽,此时 ___成为细胞中合成ATP的唯一场所。

3)该植物积累有机物速率最快的时刻是第___ h时,积累有机物总量最多的时刻在第 __ h之间。

4)在第8h,植物体释放到密闭容器中的氧气量____(大于/等于/小于)植物体消耗的氧气量。

 

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