Question

科学家发现将外源生长激素基因导人绵羊体内后，转基因绵羊的生长速率比普通绵羊提高30%，体型增大50%。回答下列问题。

（1）若要获得猪的生长激素基因，应从猪的______________________内提取mRNA作为模板，不能从猪其他细胞提取mRNA的原因是_____________________。以mRNA为模板，在___________酶的催化下合成cDNA，然后利用_____________________技术在体外大量扩增生长激素基因，该技术消耗的原料是dCTP、dATP、dGTP、dTTP，而不是4种脱氧核苷酸，推测原因是______________________。

（2）将生长激素基因导入绵羊的_____________________（细胞）之前，需要先构建________。该过程用到的工具酶是_____________________。

（3）为了检测获得的转基因绵羊中外源生长激素基因是否表达，在分子水平上，可采用的方法是______________________；在个体水平上，可以采用的鉴定方法是____________________。

Answer

垂体细胞 生长激素只在垂体细胞中表达，在其他细胞中不表达 逆转录酶 PCR 这些物质作用除了能为反应提供原料，还能提供能量 受精卵 基因表达载体 限制性核酸内切酶和DNA连接酶 抗原—抗体杂交 转基因羊的体重和生长速率

【解析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

2、基因工程的基本工具为限制酶、DNA连接酶和运载体。

（1）生长激素只在垂体细胞中表达，在其他细胞中不表达，所以如果要获得猪的生长激素基因，应从猪的垂体细胞内提取mRNA作为模板，以mRNA为模板在逆转录酶的催化作用下合成cDNA，利用PCR技术大量扩增目的基因，根据ATP可以为细胞提供能量进行推测，采用的原料是dCTP、dATP、dGTP、dTTP，而不是4种脱氧核苷酸，原因是这些物质作用除了能为反应提供原料，还能提供能量。

（2）动物的常用的受体细胞是受精卵，导入之前需要先构建基因表达载体，需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶。

（3）基因的表达最终形成蛋白质，所以在分子水平上可以采用抗原—抗体杂交技术，在个体水平上测定转基因羊的体重和生长速率。