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几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质...

几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内,可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题:

1)在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA,常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料,原因是____________。提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是____________

2)以mRNA为材料可以获得cDNA,其原理是________________________________________________

3)若要使目的基因在受体细胞中表达,需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导人受体细胞,原因是________________________________________________________________________(答出两点即可)。

4)当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是____________

5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是____________

 

嫩叶组织细胞易破碎 相应mRNA多抑制RNA被水解 逆转录过程的碱基互补配对 目的基因因缺少相应的启动子和终止子,缺少复制原点 磷酸二酯键 转录和翻译过程受影响 【解析】 基因工程技术的基本步骤: (1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 (2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 (3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 (4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 (1)由于嫩叶组织细胞易破碎,因此在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA,常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料。提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是防止提取的mRNA被RNA酶分解。 (2)以mRNA为材料可以获得cDNA,原因是在逆转录酶的作用下,以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则可以合成cDNA。 (3)若要使目的基因在受体细胞中表达,需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞,原因是:质粒载体中有启动子、终止子,便于目的基因的表达;质粒中含有复制原点等。 (4)DNA连接酶催化形成的化学键是磷酸二酯键。 (5)基因表达包括转录和翻译两个步骤,若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,其可能的原因是几丁质酶基因没有转录或翻译异常。
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考点分析:
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科研人员发现在黄石公园的温泉中生活着一种水生嗜热菌,并进行了一系列研究:

1)由于温泉中菌的浓度很低,所以需要首先将菌进行“富集”,应该在_____(全营养/MS/以尿素为唯一氮源)的_____(液体/固体)培养基进行培养。

2)当菌“富集”起来后,需要对菌种进行分离,得到_____,通常用划线分离法或稀释涂布分离法来实现此目的。

3)得到纯化的菌株后,科研人员首先对其进行了初步鉴定:首先从平板上菌落的_____等特征来观察菌落,并在_____下观察细菌的形态(例如:棒状、杆状或是球型等)。

4)科研人员为了找出水生嗜热菌最适的培养温度,做了相关实验,实验的主要步骤依次是_______________等。

a 配置培养基   

b对相应培养基进行高压蒸汽灭菌  

c对相应培养基进行灼烧灭菌 

d 对相应培养基进行干热灭菌       

e调节培养基至适宜的pH值  

f 将培养基分装至各三角瓶   

g在每瓶培养基中分别接种相同量的纯化后的菌种  

h每三瓶为一组,分别放置1020304050℃下进行培养

i每三瓶为一组,分别放置在5060708090℃下进行培养    

j测量每瓶培养基中细菌在一天后的菌体浓度,并对每个温度的三组取均值   

k测量每瓶培养基中细菌在十天后的菌体浓度,并记录每个温度下的最高值

5)科研人员还鉴定了该菌在不同抗生素下的生长情况,该实验结果在培养该菌时的应用价值是_________

6)科研人员在此菌种发现一种耐高温的_____酶,此酶可用于 PCR 实验。

 

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为有效防治土地沙漠化、提高森林覆盖率,我国北方某地用飞机在植被稀少的荒山分批播种   马尾松,之后封山育林,禁止放牧和采伐。研究者对不同年限的森林进行了调查。

1)马尾松属于生态系统营养结构中的_____。研究者对全封育和半封育的10年龄马尾松林进行_____取样调查,发现全封育下的马尾松平均胸径明显高于半封育。原因之一是:积累的树木凋落物被生态系统成分中的_________利用,产生的___提高了土壤肥力,给马尾松的生长提供更多的营养物质。

2)研究者在样方内通过_____的方法对全封育20年、30年、50年森林进行物种丰富度 调查。发现随封育年限增长,树种逐渐增至十余种,阔叶树种类和比例增大,动物种类也逐   渐增加,此过程属于群落的_________。调查还显示,随封育年限增长,土壤含水量逐渐增加,研究者推测这是树种发生变化的原因之一。

3)为进一步研究封育条件下树种变化的原因,研究者用马尾松和2种阔叶树树苗进行实验,结果如下。

 

不同土壤含水量下的净光合

速率相对值

不同光照条件下光合产物输出到

顶芽的比例(%

8 6 %

11 3%

18 6%

全日照

林窗环境

室内弱光

马尾松

16

31

39

17

58

75

荷木

11

31

36

9

78

185

黄果厚壳桂

04

19

33

18

80

97

 

 

据结果分析,马尾松能够在荒山的强光、干旱条件下快速生长的原因是:_____。随着土壤含水量和群落枝叶繁茂度的增加,马尾松在与荷木、黄果厚壳桂等阔叶树的_____中被逐渐替代。

4)近年来,为了人类的可持续发展,国内外实行了碳汇制度,把森林的生态价值经济化, 由高耗能企业向林场出资购买一定量的碳汇以抵消相应CO2排放量。请从企业和林场两方面分析此项举措如何从整体上实现了生态效益和经济效益的统一_____

 

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阿尔茨海默症是一种神经退行性疾病,科研人员进行了如下研究。

1)研究发现,患者脑部的神经元数量及神经元之间的_____(结构)明显减少。进一步研究发现,患者脑部的神经元_____(填胞体、树突或轴突)内的核糖体上合成的β-淀粉样蛋白()有异常积累的现象。

2)科研人员推断这种异常积累可能与_____的酶 C 表达量下降有关,于是提取正常人和患者的神经元DNA,对酶C基因进行测序,测序结果完全一致,说明导致酶C基因表达量改变的原因不是_________

3)为了研究酶C表达量下降的原因,科研人员分别提取正常人和患者神经元的酶C基因启动子的DNA片段,再分别用具有相同识别序列(CCGG)的HpaIIMspI酶切(但HpaII不能切割甲基化的胞嘧啶)。结果显示正常人该DNA片段用MspI切割后产生的片段数目与用HpaII切割后产生的片段数目的差值_____,说明患者细胞中酶C基因启动子甲基化程度更高,从而影响了_____与酶 C 基因启动子的结合,从而影响了酶C基因的_____

4)科研人员认为是形成阿尔兹海默症的原因,设法降低了酶C的甲基化水平以及增加了酶C基因的表达量,结果发现β-淀粉样蛋白沉积被清除,但阿尔兹海默症却没有疗效, 请分析原因____

 

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水稻是我国主要的粮食作物之一,它是自花传粉的植物。提高水稻产量的一个重要途径是利用杂交种(F1)的杂种优势,即F1的性状优于双亲的现象。

1)杂交种虽然具有杂种优势,却只能种植一代,其原因是_____,进而影响产量。为了获得杂交种,需要对_____去雄,操作极为繁琐。

2)雄性不育水稻突变体S表现为花粉败育。在制种过程中,利用不育水稻可以省略去雄操作,极大地简化了制种程序。

将突变体S与普通水稻杂交,获得的 F1 均可育,F2 中可育与不育的植株数量比约为3∶1,说明水稻的育性由_____等位基因控制,不育性状为_____性状。

研究人员在突变体S中发现了控制水稻光敏感不育的核基因pms3,该基因并不编码蛋白质。为研究突变体Spms3基因表达量和花粉育性的关系,得到如下结果(用花粉可染率的高低代表花粉育性高低)。

不同光温条件下突变体 S 的花粉可染率(%)

短日低温

短日高温

长日低温

长日高温

419

302

51

0

 

 

该基因的表达量指的是_____的合成量。根据实验结果可知,pms3基因的表达量和花粉育 性关系是_____

3)结合以上材料,分析培育水稻杂交种的简要流程为_____;保存突变体S的简要流程为_____。(填选项前的符号)

a在短日低温条件下;b在短日高温条件下;c在长日低温条件下;d在长日高温条件下;

e以突变体S为母本,与普通水稻杂交; f 以普通水稻为母本,与突变体S杂交;

g使突变体S自交;h使普通水稻植株自交;

i收获S植株上所结的种子; j收获普通水稻植株上所结的种子。

(4)科研人员在研究过程中发现一株新的同样性状的雄性不育单基因隐性突变体M,为研究M突变基因与S的突变基因的关系,将MS进杂交,若子一代_____,则说明两者的突变基因互为等位基因;若子一代_____,则说明两者的突变基因互为非等位基因。

 

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小麦是我国北方的主要农作物,研究环境条件变化对其产量的影响对农业生产有重要意义。

1)光合作用光反应利用光能分解______________,之后利用光反应产生的______________,将 CO2转化为糖类。其中,影响光合作用的内部因素包括______________(写出两个)。

2)科研人员测定小麦一昼夜净光合速率(Pn)的变化,发现小麦与其他植物一样出现了“午睡”现象。一般认为,午后温度较高,植物通过蒸腾作用使叶片降温,同时,由于保卫细胞失水导致叶片气孔开度_____。这一变化影响了光合作用的_____过程,使午后小麦光合速率降低。

3)科研人员测定了同一株小麦两种不同向光角度的叶片(接收直射光照面积不同)午后部分指标,结果如下表。

 

净光合速率(Pn

叶片温度(TL

胞间 CO2 浓度(Ci

直立叶

129

375

250

平展叶

88

377

264

 

对相关数据进行直立叶和平展叶叶片温度无明显差异,说明二者的气孔开度________,但平展叶净光合速率却_____,此时胞间 CO2 浓度较高,说明气孔开闭引起的胞间 CO2 浓度不足不是造成午睡现象的唯一因素。

4)科研人员推测,午间强光照可能会导致_____上的由色素和蛋白质组成的光系统II 发生损伤,导致光合作用的光反应过程速率下降,进而抑制叶片的光合作用速率。D1 是对光系统Ⅱ 活性起调节作用的关键蛋白,科研人员使用蛋白质凝胶电泳技术检测不同光照条件下的 D1 含量,结果如图 1 所示,实验中微管蛋白的作用是做参照以排除_____ 对实验结果的影响,分析可知_____,从而在一定程度上导致“午睡”现象。

5)水杨酸(SA)是一种与植物抗热性有关的植物激素,科研人员用适宜浓度的 SA 喷洒小麦叶片后,测定两种光照条件下的 D1 蛋白含量,结果如图 2 所示,可推测,SA 对小麦午间光合作用的影响及机制是:_____

6)综合上述研究,请提出两项农业生产中减少“午睡”现象提高小麦产量的合理措施_____

 

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