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利用紫外线诱变选育高产β­胡萝卜素的三孢布拉霉负菌,未突变菌不能在含有一定浓度的...

利用紫外线诱变选育高产β­胡萝卜素的三孢布拉霉负菌,未突变菌不能在含有一定浓度的β­紫罗酮的培养基上生长,菌体随β­胡萝卜素含量的增加从黄色加深至橙红色。图甲为选育菌株及提取、获得β­胡萝卜素的流程,请回答下列问题:

1)用紫外线照射三孢布拉霉负菌的目的是____________________。为选出高产突变菌株,还应在培养基中添加____________________,在接入菌种前,应对培养基进行____________________,以避免杂菌污染。

2)某同学进行正确的接种操作,平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是__________(填“稀释涂布平板法”或“平板划线法”);由于______________________________,所以培养基上只有少数菌能生长形成菌落。

 

诱导其发生基因突变 一定浓度的β­紫罗酮 高压蒸汽灭菌 稀释涂布平板法 基因突变频率很低,只有少数发生基因突变的菌才能生长、繁殖 【解析】 1、实验室常用的灭菌方法 ①灼烧灭菌:将微生物的接种工具,如接种环、接种针或其他金属工具,直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌,此外,在接种过程中,试管口或瓶口等容易被污染的部位,也可以通过火焰燃烧来灭菌; ②干热灭菌:能耐高温的,需要保持干燥的物品,如玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等,可以采用这种方法灭菌; ③高压蒸汽灭菌:将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内,为达到良好的灭菌效果,一般在压力为100 kPa,温度为121℃的条件下,维持15~30 min。 2、微生物常见的接种的方法: ①平板划线法; ②稀释涂布平板法。 (1)用紫外线照射三孢布拉霉负菌的目的是诱导其发生基因突变;由于未突变菌不能在含有一定浓度的β-紫罗酮的培养基上生长,因此在选出高产突变菌种时,还应在培养基中添加一定浓度的β-紫罗酮;在接入菌种前,应对培养基进行高压蒸汽灭菌,以避免杂菌污染。 (2)乙图固体平板培养基中菌落均匀分布,该同学的接种方法是稀释涂布平板法;只有少数菌能生长形成菌落的根本原因是基因突变频率低和不定向性,只有少数基因突变的菌才能生长、繁殖。
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资料一:PCR(聚合酶链式反应)三个基本反应步骤是模板DNA在体外加热至95℃时解旋成单链,温度降至55℃左右,引物与模板单链按碱基互补配对的原则结合,再调至72℃左右时,DNA聚合酶沿5′→3′(磷酸到五碳糖)的方向延伸引物合成互补链。三个步骤完成一次称为一个循环。

资料二:图1显示了目的基因及其上限制酶切点,ABCD是四种单链DNA片段;图2是质粒(显示限制酶切点和标记基因),一般来说,为了使切割后的目的基因与运载体结合,往往使用两种限制酶,同时还要破坏载体上的一个标记基因。根据资料回答下列问题:

1)若利用PCR技术增加目的基因的数量,所用的酶是__________。由图1可知,ABCD四种单链DNA片段中应选取__________作为引物,该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生DNA片段__________个。

2)为了提高目的基因和质粒的重组成功率,同时有利于受体细胞的筛选,应该选择的限制酶是________。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对质粒进行切割,假设同时只有任意两个位点被切割且每次机会相等,则形成的含有完整抗四环素基因的DNA片段有__________种。

3)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是__________

4)对基因组文库的描述,不正确的是__________

A.含有某种生物的全部基因                    B.基因中含有启动子和内含子

C.文库的基因是通过受体菌承载的                D.文库中的全部基因可以在物种间交流

 

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如图为某草原生态系统的食物网,下表为食物链“草→鼠→鹰”中各种群一年间的能量变化(单位:百万千焦/年)。请分析回答下列问题:

种群

同化的

总能量

用于生长、发育

和繁殖的 能量

呼吸消耗

传递给分解者

传递

给下一营养级

未被利用的

能量

 

 

695

70

190

455

190

9

 

10

 

45

35

10

25

微量(不计)

 

 

1)生态系统的组成成分中除图中所示的成分外,还应该包括____________________。蛇由于某种原因数量明显减少,导致鼠的数量先增多后减少,最后趋于稳定,这属于生态系统的__________调节。

2)据表分析,草用于生长、发育和繁殖的能量为__________百万千焦/年,鼠呼吸消耗的能量为__________百万千焦/年,能量从鼠到鹰的传递效率为__________%(保留1位小数)。

3)未来一段时间内,要保证该生态系统的总能量增加,条件是____________________

 

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为探究铅中毒对大鼠学习记忆的影响,将大鼠分为四组,其中一组饮水,其余三组饮醋酸铅溶液,60天后进行检测。

检测a:用下图水迷宫(池水黑色,大鼠无法看到平台)进行实验,大鼠从入水点入水,训练其寻找水面下隐蔽平台,重复训练4天后撤去平台,测定大鼠从入水点到达原平台水域的时间;

检测b:测定脑组织匀浆铅含量及乙酰胆碱酯酶(AChE)活性。AChE活性检测原理:AChE可将乙酰胆碱(ACh)水解为胆碱和乙酸,胆碱与显色剂显色,根据颜色深浅计算酶活性。

 

组别

醋酸铅溶液

浓度/g·L

1

脑组织铅

含量

/g·gprot1

AChE活性

/U·mgprot

1

到达原平台水域时间/s

000

018

156

227

005

029

137

231

100

057

108

269

200

105

076

364

 

1)表中用于评价大鼠学习记忆能力的指标是__________,通过该指标可知第__________组大鼠学习记忆能力最弱。

2ACh是与学习记忆有关的神经递质,该递质由突触前膜释放进入__________,与突触后膜上的受体结合,引发突触后膜电位变化。ACh发挥效应后在__________酶的催化下水解,本实验是通过检测单位时间内__________的生成量,进而计算该酶的活性。

3)表中结果表明:脑组织铅含量越高ACh水解速度越____________

4)水迷宫实验过程中,使短期记忆转化为长期记忆的措施是__________,以此强化神经元之间的联系。

 

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某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题。

1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养液及其他培养条件均相同。一段时间后,观察到甲细胞数量比乙细胞数量__________

2)在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量血清,其原因是__________

3)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长__________。药物试验需要大量细胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比乙细胞可以传代的次数更__________。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用__________处理。

4)为了防止培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的__________

5)已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关,要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响,可将甲细胞分为AB两组,A组细胞培养液中加入__________B组细胞培养液中加入等量无菌生理盐水,经培养后,从AB两组收集等量细胞,通过分别检测X基因在AB两组细胞中的____________________合成水平的差异,确定Y的药效。

 

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如图表示细胞内DNA复制和细胞外PCR扩增两个过程两反应过程的条件中相同的是(   

A.模板 B.原料 C. D.能量供应

 

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