Question

电影《我不是药神》引起人们对慢性粒细胞白血病（CML）的关注，CML患者的造血干细胞中22号染色体上的bcr基因与来自9号染色体上的基因abl形成bcr/abl融合基因，该融合基因的表达产物能促进骨髓细胞内mTOR蛋白过度表达从而引起白血病。抗mTOR单克隆抗体可抑制mTOR蛋白的作用而治疗CML。回答下列问题：

（1）科学家用___________对小鼠进行注射，一段时间后从小鼠脾脏提取出B淋巴细胞；他们通过动物细胞培养技术培养小鼠骨髓瘤细胞，培养过程中需要定期更换培养液，原因是___________。

（2）使用___________（生物的方法）将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，置于选择培养基中筛选出杂交瘤细胞，并经过___________培养和抗体检测，多次筛选后获得的细胞具有的特点是 ___________，将这些细胞注入小鼠腹腔内培养，在___________中可提取得到抗mTOR单克隆抗体。

（3）抗mTOR单克隆抗体在治疗CML上，具有的特点是_______________________。

Answer

mTOR（蛋白） 防止代谢产物积累对细胞自身造成危害 灭活的（仙台）病毒 克隆化 能迅速大量繁殖，又能产生单一性抗体 腹水 特异性强、灵敏度高，并可大量制备

【解析】

1.动物细胞培养的流程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中(原代培养)→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液(传代培养)→放入二氧化碳培养箱培养。

2.动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境;②营养；③温度和pH ；④气体环境：95%空气+5%CO2。

3.单克隆抗体的制备流程：人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，最终通过培养杂交瘤细胞获得单克隆抗体。

（1）根据题意分析，该题是制备抗mTOR单克隆抗体，因此应该将mTOR（蛋白）作为抗原注射到小鼠体内，一段时间后从小鼠脾脏提取出相应的B淋巴细胞；动物细胞培养过程中需要不断的更新培养液，是为了防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。

（2）可使用灭活的仙台病毒诱导骨髓瘤细胞和经免疫的B淋巴细胞融合；选择培养基筛选出的杂交瘤细胞需要经过克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选后符合要求的杂交瘤细胞能迅速大量繁殖，又能产生单一性抗体；将筛选到的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养，在腹水中可提取得到抗mTOR单克隆抗体。

（3）抗mTOR单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高，并可大量制备的优点。