Question

PCR技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题，而被广泛应用，此过程需要一种Taq DNA聚合酶。请回答有关问题：

（1）体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA，而PCR技术中应用________________。

（2）Taq DNA聚合酶是从水生耐热细菌Taq中分离的。

①Taq DNA聚合酶的功能是_________________________________。

②Taq DNA聚合酶的化学本质为蛋白质，可用______________法和_____________法进行分离。

（3）相对于细菌分离，DNA分子的分离和提取操作要复杂的多。

①在DNA提取中两次用到蒸馏水，其目的分别是________________________、_________________________________。

②实验中能否以哺乳动物成熟的红细胞为实验材料？__________________________为什么？______________________________________________________。

（4）PCR中加入的引物有_________种，加入引物的作用是_______________________________。

Answer

高温使DNA分子热变性 催化脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键 凝胶色谱 电泳 使血细胞破裂，释放出DNA分子 稀释NaCl溶液，使DNA分子析出 不能 哺乳动物成熟的红细胞中无核DNA分子 2 作为DNA复制的起点

【解析】

PCR技术：
1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；
2、原理：DNA复制；

3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物；
4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；
5、过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。

（1）体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA，而PCR技术中应用高温使DNA分子热变性。

（2）①Taq DNA聚合酶催化脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键。

②TaqDNA聚合酶的化学本质为蛋白质，可用凝胶色谱法和电泳法进行分离。

（3）①在DNA提取中两次用到蒸馏水，第一次的目的是使血细胞吸水破裂，释放出DNA分子、第二次是稀释NaCl溶液，使DNA分子析出。

②实验中不能以哺乳动物成熟的红细胞为实验材料，原因是哺乳动物成熟的红细胞中无DNA分子。

（4）PCR中加入的引物有2种，加入引物的作用是分别与两条单链的一端结合，作为DNA复制的起点。