Question

测定水样是否符合饮用水的卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的总数。大肠杆菌在含有伊红美蓝的固体培养基(EMB培养基)上长出的菌落星黑色。如图所示；滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到EMB培养基止培养→统計菌落数目。据图回答问题。

(1)过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要经过灭菌处理的是___________。与过滤有关的操作都要在酒精灯火焰旁进行。

(2)待测水样过滤完之后，还有部分细菌吸附在滤杯杯壁上，将这部分细菌也尽可能集中到滤膜上的操作为_________________________________。

(3)将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，这属于微生物培养中的___________操作。从功能上看，EMB培养基属于___________培养基。

(4)无菌操作下将90ml无菌水加入到10ml待测水样中，这样就将待测水样稀释了___________倍，将稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数为45，黑色菌落为5，则1升待测水样中的大肠杆菌数目为___________个。

(5)若要测定待测水样中酵母菌的数目，应更换上述过滤装置中的滤膜，选择孔径___________(填“更大”或“更小”)的滤膜。

Answer

滤杯、滤膜和滤瓶 无菌条件下用无菌水冲洗滤杯，再次过滤 接种 鉴别 10 500 更大

【解析】

试题滤膜法是检测水样中大肠细菌群的方法。将一定量水样注入已灭菌的微孔薄膜的滤器中，经过抽滤，细菌被截留在滤膜上，将滤膜贴于伊红美蓝培养基上，经培养后计数和鉴定滤膜上生长的大肠菌群菌落，依据过滤水样计算每升或每100毫升水样中的大肠菌群数。操作简单、快速，主要适用于杂质较少的水样。

（1）过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，这些实验仪器都需要经过灭菌处理，与过滤有关的操作都要在酒精灯火焰旁进行，防止杂菌的污染。

（2）待测水样过滤完之后，还有部分细菌吸附在滤杯杯壁上，此时可以在无菌条件下，用无菌水冲洗滤杯，再次过滤，将这部分细菌也尽可能集中到滤膜上。

（3）将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，属于微生物培养中的接种操作。从功能上看，该培养基中含有伊红美蓝，因此EMB培养基属于鉴别培养基。

（4）无菌操作下将90ml无菌水加入到10ml待测水样中，这样就将待测水样稀释了10倍；根据大肠杆菌鉴定的原理可知，黑色菌落为大肠杆菌，因此1升待测水样中的大肠杆菌数目=5×（1000÷10）=500个。

（5）若要测定待测水样中酵母菌的数目，酵母菌属于真核生物，大肠杆菌属于原核生物，真核细胞的直径比原核细胞大，因此应更换上述过滤装置中的滤膜，选择孔径更大的滤膜。