Question

桃子味道酸甜，维生素C含量丰富，以桃果实为原料，制成的果汁及经发酵制成的果酒维生素C含量较高。请回答下列问题：

（1）制作果汁时常加入果胶酶，因为果胶酶能将果胶分解成可溶性的____________，从而提高果汁的出汁率和澄清度。由于溶液中的酶很难回收，为了降低成本，使果胶酶能被再次利用，一般采用物理吸附法或_____________将其固定，固定化酶一般不采用包埋法，原因是_________________________。

（2）分离产果胶酶的微生物时，可从富含有机质的土壤中取样，将土壤滤液加入含有果胶的液体培养基中进行选择培养，选择培养的目的是_________________________。通过酶解，法和吸水涨破法制得果胶酶粗提取液，为进一步纯化分离果胶酶，可将样品加入_______中进行洗脱、收集，最先洗脱出来的是样品中分子量___________（填“较大”或“较小”）的蛋白质分子。

（3）判断纯化的果胶酶是否达到要求，需要进行蛋白质纯度的鉴定。在鉴定的方法中，使用最多的是______________。

Answer

半乳糖醛酸 化学结合法 酶分子较小，易从包埋材料中漏出 增加产果胶酶的微生物的浓度（或“抑制其他微生物的繁殖，促进目的菌的生长繁殖”） 凝胶色谱柱 较大 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳

【解析】

1、果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得更容易；果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，使得浑浊的果汁变得澄清。

2、固定化技术包括包埋法、物理吸附法和化学结合法，由于细胞相对于酶来说更大，难以被吸附或结合，因此多采用包埋法，固定化酶常用化学结合法或物理吸附法。

（1）制作果汁时可以加入果胶酶将果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，从而提高果汁的出汁率和澄清度。果胶酶适合采用化学结合法或物理吸附法将果胶酶固定在某种介质上；固定化酶一般不采用包埋法，原因是酶分子较小，易从包埋材料中漏出。

（2）选择培养的目的是增加产果胶酶的微生物的浓度（或“抑制其他微生物的繁殖，促进目的菌的生长繁殖”）；纯化分离蛋白质，可以采用凝胶色谱法，将样品加入凝胶色谱柱中进行洗脱、收集，由于分子量较大的蛋白质不能进入凝胶内部，所以路程短，速度快，最先洗脱出来。

（3）蛋白质纯度的鉴定使用最多的是SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳。