Question

硝基苯酚（PNP）是硝基苯酚类化合物中的一种，呈黄色，对动植物、微生物均有毒性。某研究小组欲从废弃物中分离筛选能高效降解硝基苯酚（PNP）的菌株。回答下列问题。

（1）各种微生物培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、_________（答出两点即可）。要从废弃物中对硝基苯酚（PNP）降解菌进行分离，应在以适量的_________为唯一碳源的培养基中培养。

（2）把从废弃物中采集的样品进行接种、连续富集、转接等操作，最后通过_________（填方法）接种到配制好的迭择培养基中，以便对菌落进行分离和计数，可通过_______（填颜色）消失的情况判断菌株的降解能力，进而筛选出高效菌株。

（3）研究和应用微生物的前提是________________________。在实验室培养微生物时，对玻璃器皿和试管口等容易被污染的部位常用的灭菌方法分别是________________。

（4）微生物接种的方法很多，在平板划线操作时，每次划线之前都要灼烧接种环，原因是_____________________。

Answer

氮源、无机盐（答出两点即可） PNP 稀释涂布平板法 黄色 防止杂菌入侵，获得纯净的培养物 干热灭菌、灼烧灭菌 为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，体下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到单个菌落

【解析】

本实验目的是分离分解对硝基苯酚的细菌，因此应当配制以对硝基苯酚为唯一氮源和碳源的培养基；微生物的培养过程中，常用来分离微生物的方法是稀释涂布平板法和平板划线分离法。

（1）培养基的成分一般都含有水、碳源、氮源和无机盐；为了筛选废弃物中可分解对硝基苯酚的细菌，在配置培养基时应选择对硝基苯酚（PNP）作为唯一碳源，达到筛选的目的。

（2）将微生物接种到培养基的方法为稀释涂布平板法；因PNP呈黄色，若存在分解PNP的菌株，则PNP被分解，黄色消失，故可通过黄色消失的情况判断菌株的降解能力，进而筛选出高效菌株。

（3）研究和应用微生物的前提是防止杂菌入侵，获得纯净的培养物；在实验室培养微生物时，对玻璃器皿和试管口常用的灭菌方法分别是干热灭菌和灼烧灭菌。

（4）为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，体下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到单个菌落，故在平板划线操作时，每次划线之前都要灼烧接种环。