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阅读下列材料,回答问题: 细菌的武器知多少? 为了生存,细菌通过进化获得了一系列...

阅读下列材料,回答问题:

细菌的武器知多少?

为了生存,细菌通过进化获得了一系列可用于细菌间以及细菌与宿主细胞竞争的武器系统。根据作用距离,可大致分为非接触式抑制和接触式抑制两类。第一类的典型代表是可以扩散的抗生素等小分子化合物。这一类已经被广泛应用于医学和农业,为人类健康和社会发展发挥了至关重要的作用。第二类可以通过直接接触而作用于相邻细胞,其中有一种蛋白分泌系统(T6SS)

T6SS 广泛存在于革兰氏阴性细菌中,是细菌胞质中最长的管状结构之一,可作用于真核细胞,也可以作用于原核细胞。它不需要利用表面受体,而是通过细菌间直接接触,在几毫秒内直接将底物蛋白转运至受体细菌的细胞质中。

T6SS主要由跨膜复合体(Membranecomplex TssJLM)、基座复合体(BaseplateTssEFGK)和管状结构(VipA/B Hcp)三部分组成。T6SS的结构和作用方式如图所示。

由于同种细胞之间也会发生T6SS 的穿刺转运,因此物理性的穿透并不能对细胞产生致死性伤害,而T6SS 的杀伤功能主要是由其分泌的蛋白的功能所决定的。T6SS 的分泌蛋白主要包括起运载作用的结构蛋白和发挥生物学活性的效应蛋白。T6SS 的效应蛋白一般具有对真核细胞或者原核细胞的细胞毒性。

T6SS基因簇广泛存在于革兰氏阴性细菌中,其中的一些关键基因已经被发现在细菌与真核细胞的相互作用中至关重要。科学家利用转座子随机突变的方法,在霍乱弧菌中寻找对变形虫的侵染非常重要的基因。通过分析失去毒性的突变体,发现并系统鉴定了T6SS 的基因簇。

为了避免被自身细胞杀死,T6SS 需要合成脱毒蛋白,也称免疫蛋白。免疫蛋白通过与有毒性的效应蛋白相结合来实现自我保护,而且由于免疫蛋白与效应蛋白的功能相关性,它们在基因组上的位置也是相邻的。

作为一种重要的细菌武器,T6SS 对细菌在竞争条件下的生存至关重要,而其对细菌的适应性或者竞争性的功能主要取决于T6SS 所运载的分泌蛋白的种类和功能。总之,T6SS 是细菌中最重要的菌与菌、菌与环境、菌与宿主细胞的相互作用的工具之一。

1)举例说明,革兰氏阴性细菌的效应蛋白对细菌的意义。 ______________

2)请用通俗的语言,描述(T6SS)蛋白分泌系统是如何分泌蛋白的? ______________

3)转座子是一段基因可以从基因组原来位点上单独复制或断裂下来,插入到另一位点,并导致所插入位点的基因发生突变。文中到科学家利用转座子随机突变的方法,在霍乱弧菌中寻找对阿米巴虫的侵染非常重要的基因。请根据以上信息,完善这一实验的实验设计方案。 ______________

4)病原菌的致病性主要依赖于分泌的毒素、蛋白酶等毒性分子,请根据文章的内容,提出一条预防细菌感染的思路。______________

 

T6SS 的分泌蛋白主要包括起运载作用的结构蛋白和发挥生物学活性的效应蛋白。T6SS 的效应蛋白一般具有对真核细胞或者原核细胞的细胞毒性,从而对自身实现了保护机制,T6SS 是细菌中最重要的菌与菌、菌与环境、菌与宿主细胞的相互作用的工具之一。 T6SS主要由跨膜复合体、基座复合体和管状结构三部分组成,首先跨膜/基座复合体将管状结构固定在细胞膜上,然后外鞘的收缩驱动Hcp内管及其结合的顶端蛋白VgrG和PAAR排出到细胞外或者相邻细胞内,从而实现了分泌蛋白的分泌。通俗的讲,如果将T6SS比喻为细菌的弓箭,那么由膜-底座复合体和外鞘组成的弓能够将由Hcp组成的箭体和VgrG-PAAR组成的箭头在几毫秒内弹射出去。 用转座子技术让霍乱弧菌发生基因突变,然后再让这些突变霍乱弧菌去侵染阿米巴虫,通过对阿米巴虫生活状态观察,从存活的阿米巴虫体内提取失去毒性的突变体进行相关T6SS 的基因的检测,发现并系统鉴定了T6SS 的基因簇。 设法阻断细菌毒素、蛋白酶等毒性分子的分泌过程,从而避免对人类造成伤害,具体做法是通过转座子技术改造细菌的T6SS 的基因簇,使细菌突变为失去毒性的突变株(即阻断了细菌毒素、蛋白酶等毒性分子的分泌过程) 【解析】 T6SS的分泌蛋白的过程 位于T6SS结构最尖端的是VgrG三聚体和PAAR蛋白。细菌基因组可以编码多个VgrG和PAAR基因,但是每次外管的收缩只会将一个PAAR蛋白、三个VgrG蛋白,以及数百个Hcp蛋白分泌出去。如果将T6SS比喻为细菌的弓箭,那么由膜-底座复合体和外鞘组成的弓能够将由Hcp组成的箭体和VgrG-PAAR组成的箭头在几毫秒内弹射出去。外鞘收缩释放出惊人的能量,相当于4 000个ATP水解释放的能量。并且,由于外鞘和内管的螺旋结构,收缩过程导致的管体旋转角速度能够达到约每分种12万转。这为T6SS穿透受体细胞的内外膜和细胞壁提供了足够的穿透力 (1)T6SS (蛋白分泌系统)广泛存在于革兰氏阴性细菌中,T6SS 的杀伤功能主要是由其分泌的蛋白的功能所决定的。T6SS 的分泌蛋白主要包括起运载作用的结构蛋白和发挥生物学活性的效应蛋白。T6SS 的效应蛋白一般具有对真核细胞或者原核细胞的细胞毒性,从而对自身实现了保护机制,T6SS 是细菌中最重要的菌与菌、菌与环境、菌与宿主细胞的相互作用的工具之一。 (2)T6SS主要由跨膜复合体、基座复合体和管状结构三部分组成,首先跨膜/基座复合体将管状结构固定在细胞膜上,然后外鞘的收缩驱动Hcp内管及其结合的顶端蛋白VgrG和PAAR排出到细胞外或者相邻细胞内,从而实现了分泌蛋白的分泌。通俗的讲,如果将T6SS比喻为细菌的弓箭,那么由膜-底座复合体和外鞘组成的弓能够将由Hcp组成的箭体和VgrG-PAAR组成的箭头在几毫秒内弹射出去。 (3)题意显示,转座子是一段基因可以从基因组原来位点上单独复制或断裂下来,插入到另一位点,并导致所插入位点的基因发生突变,利用这一原理,用转座子技术让霍乱弧菌发生基因突变,然后再让这些突变霍乱弧菌去侵染阿米巴虫,通过对阿米巴虫生活状态观察,从存活的阿米巴虫体内提取失去毒性的突变体进行相关T6SS 的基因的检测,发现并系统鉴定了T6SS 的基因簇。 (4)根据这篇文章我们懂得了病原菌的致病性的机理主要依赖于分泌的毒素、蛋白酶等毒性分子,为了预防细菌的感染,首要的做法是设法阻断细菌毒素、蛋白酶等毒性分子的分泌过程,从而避免对人类造成伤害,具体做法是通过转座子技术改造细菌的T6SS 的基因簇,使细菌突变为失去毒性的突变株(即阻断了细菌毒素、蛋白酶等毒性分子的分泌过程)。
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考点分析:
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免疫系统会影响代谢系统,而代谢系统也会反作用于免疫系统。科学家发现肿瘤微环境中代谢环境的变化,会压制免疫系统,促进肿瘤的生长。对此科学家了探索葡萄糖代谢对免疫因子—干扰素反应的影响做了一系列实验。

1)干扰素的化学本质是____________。某些信号分子与细胞表面或内部的___________结合后,便能激活细胞产生干扰素,启动免疫反应。_______作为细胞能量的最主要来源,其代谢过程中产生的各种代谢产物,也会参与到干扰素的免疫反应中。

2)科学家做了一个实验,给一组小鼠禁食,降低其血糖水平;给另一组小鼠喂高糖食物,升高其血糖。然后分别给两组小鼠感染病毒,实验结果如图 1,可知,__________________________

3)为进一步研究代谢对免疫的影响,设计实验组为敲除免疫细胞的葡萄糖代谢过程的关键酶 HK,结果如图 2,处理 1 应是____________,干扰素的含量上升,说明____________________

4)葡萄糖的分解分两种,一种是_____呼吸;另一种是_____呼吸。到底是哪种代谢途径抑制干扰素产生呢?写出实验思路并给出预期结果_____

5)以上实验研究结果给你的生活启示是:_______________________________________

 

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羧甲基纤维素钠(CMC)是常用的食品添加剂,不能被人体消化吸收,因此通常被认为是安全的食品添加剂。研究者用含1.0%CMC无菌水作为饮用水,连续饲喂实验小鼠12周,测定小鼠体重,结果如图1、图2所示。

(1)图1所示实验中的对照处理是___________。图1结果显示,食用CMC能够___________。综合图1、图2结果,通过比较___________,说明CMC的这种作用依赖于小鼠消化道内的各种微生物。

(2)有人提出:小鼠摄入的CMC改变了其肠道内各种微生物的比例。为检验上述推测,研究者设计了如下实验:

①搜集___________(填图中分组编号)小鼠粪便制成悬浮液涂布于上___________(填下列选项前的序号)。

a.以CMC为碳源的液体培养基  b.全营养液体培养基c.以CMC为碳源的固体培养基  d.全营养固体培养基

②接种后置于___________(填“无氧”或“有氧”)条件下培养,通过观察___________以初步鉴定小鼠消化道中的微生物类群。

③统计比较___________,以确定推测是否成立。

(3)为进一步研究“小鼠体重变化是否由CMC引起的小鼠消化道内各种微生物比例改变所致”,研究者设计了粪便移植实验,并检测了被移植小鼠体重的变化。请将下列选项填入下表中(选填选项前的符号),完成实验方案。

组别

被移植小鼠

提供粪便小鼠

饮用水

实验组

 

 

 

对照组

无菌小鼠

 

同上

 

a.普通小鼠

b.无菌小鼠

c.饲喂含CMC无菌水12周的普通小鼠

d.饲喂无菌水12周的普通小鼠

e.含1.0%CMC的无菌水

f.无菌水(不含CMC)

 

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拟南芥AtNX1基因编码一个位于液泡膜上的Na+转运蛋白,可将Na+逆浓度梯度转运至液泡内,以降低Na+毒害和提高植物的耐盐性。研究人员利用根瘤农杆菌侵染法将AtNXl基因转化到烟草等植物中,能显著提高其耐盐特性。

(1)AtNX1基因提高耐盐机理为:Na+转运至液泡内使__________升高,利于吸水。

(2)AtNX1基因可从构建拟南芥cDNA文库中获取。

①构建cDNA文库需要的工具酶有__________

a.限制酶      b.DNA连接酶    c.RNA聚合酶       d.逆转录酶

②利用PCR技术从cDNA文库中获取AtNX1基因(基因序列未知),需根据AtNX1蛋白氨基酸序列设计引物,引物序列可以有多种原因是____________________。在PCR体系中需加入其中__________引物(填“全部”或“任意1种”或“其中2种”)。

(3)如图为培育转基因苗的基本操作过程。

①步骤Ⅲ目是________________________________________

②步骤Ⅳ目是获得耐盐的____________,其培养基中除营养物质和植物激素外还应有__________

③步骤Ⅳ和Ⅴ过程要注意控制培养基中__________的浓度比例,以便获得幼苗。

 

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千岛湖是1960年为建设水电站而筑坝蓄水形成的大型人工湖,人工湖构建以来气候变化相对稳定,1998、1999年发生大面积藻类水华。为探究这次水华爆发的原因,研究者分析并调查了影响藻类数量变动的主要环境因素,结果如下图。

(1)图1所示箭头所指方向____(能、不能)表示能量流动的方向,鲢鱼、鳙鱼与浮游动物的关系是______

(2)藻类水华的发生通常被认为是N、P污染导致水体富营养化的结果。水体富营养化后,水中含氧量降低,原因一是藻类大量增生,由于藻类的____,导致夜间水体中含氧量明显下降;另一原因是,藻类大量死亡,导致____(填“需氧型”、“厌氧型”)微生物的大量繁殖,使水体含氧量进一步减少。水中含氧量降低和藻类分泌的毒素都会引起水生动物死亡,加剧水体的污染,形成_____(正反馈、负反馈),最终导致生态系统崩溃。

(3)分析图2发现,“水体富营养化”学说不能很好解释1998、1999年千岛湖水华发生的原因,依据是_______

表1不同年份鲢鱼、鳙鱼数量相对值

年份

鲢鱼、鳙鱼

银鱼

1993-1997

6.66

5.43

1998-1999

2.16

7.72

 

 

 

(4)由表1、图1、2综合分析,湖中鲢、鳙主要捕食_____,由于渔业的过度捕捞以及银鱼数量的增加可能会导致_____,使藻类数量增加,最终导致了水华的发生。

(5)由于千岛湖是人工湖泊,发育时间较短,因此生态系统的_____简单,稳定性较差。千岛湖水华现象警示我们,要降低人工湖泊水华发生的频率,可以采用_____措施。

 

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哺乳动物血液中 CO2 含量变化能够作用于神经系统,调节呼吸运动的频率和强度,为了研究该反射过程中感受器的存在部位,科研人员进行了一系列实验研究。

1)哺乳动物因剧烈运动产生的__________等酸性物质能与血浆中 HCO3- 反应,使血液中CO2 含量升高。CO2 浓度变化可以使一些特定的感受器兴奋,兴奋以_____________的形式沿传入神经传导至呼吸中枢,使呼吸运动加深加快。这种维持内环境 pH 稳态的过程是在______________调节的作用下,通过各系统的协调活动实现的。

220 世纪初,科学界认为 CO2感受器可能位于脑部,也可能位于躯体的动脉管壁上。为探究这一问题,科研工作者将连接头部与躯干的血管断开,只保留由动脉传向脑的传入神经,同时将 A 狗的颈动脉和颈静脉分别与 B 狗相应血管相连,A 狗躯干的呼吸运动靠人工呼吸机维持。

实验过程中,始终保持 B 狗处于呼吸平稳状态,目的是保证 A 狗脑部_______________

科研人员将呼吸机暂停一小段时间,A 狗血液中的 CO2 含量____________,发现 A 狗鼻部呼吸运动加深加快,该实验结果说明_______________。该结果_________(能、不能)说明脑部不存在 CO2 感受器。

3)基于上述研究,请你为 CO(煤气)中毒的紧急治疗提供一种思路___________

 

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