营养缺陷型大肠杆菌需在基本培养基中添加某些物质才能生长。 A 菌株为甲硫氨酸（met-）和生物素（bio-）缺陷型突变体，B 菌株为苏氨酸（thr-）、亮氨酸（leu-）、硫胺素（thi-）缺陷型突变体。用A、B 两种菌株进行 4组实验，培养条件和结果如下图所示。
（1）培养基为细菌生长提供水、无机盐、________。乙组培养基出现菌落的频率为 10-7， 大肠杆菌单个基因发生突变的几率约为10-7，科学家判断乙组出现菌落不是基因突变 的结果，其理由是________。推测基本培养基出现菌落是由于基因的转移和重组，丁 组实验结果说明这种基因的转移需要两种菌株细胞________。
（2）科学家用某种药物处理A 或 B 菌株使其停止分裂（但不致死）， 混合并培养，过程及 结果如下。
Ⅰ：处理过的 B菌株+未处理的 A菌株→基本培养基上无菌落
Ⅱ：处理过的A 菌株+未处理的 B菌株→基本培养基上有菌落
结果说明两菌株 DNA 转移的方向是________。
a．A→B b．A←B c．A
B d．不确定
（3）进一步研究发现某些菌株拟核上有一段DNA序列（F 因子），其上有复制原点（oriT）。 细菌混合后，F 因子的一条链由供体菌逐步转移至受体菌，在受体菌中复制后整合到拟核 DNA 上，发生基因重组。留在供体菌中的 F 因子单链通过自我复制恢复双链。若无 F 因子则不能发生 DNA 转移。
①由此推测上述（2）中实验 I 基本培养基无菌落的原因是________。
②上述 DNA 转移和复制过程可用下图________表示。
（4）A 菌株（met-、bio-）对链霉素敏感，B 菌株（thr-、leu-、thi-）具有链霉素抗性。将 A、 B 菌株混合，在不同时间点搅拌混合菌液，以中断DNA 转移。之后将各时间点中断转移的菌液接种在含如下物质的基本培养基上选择培养，分别记录出现菌落的短混合时间。
培养基 | 所含物质 | 最短混合时间 |
1 | 链霉素+亮氨酸（leu））+硫胺素（thi） | 9min |
2 | 链霉素+苏氨酸（thr）+硫胺素（thi） | 11 min |
3 | 链霉素+苏氨酸（thr） +亮氨酸（leu） | 18 min |
①培养基中均加入链霉素的目的是________。1号培养基出现菌落的原因是________。
②在选择培养基上出现菌落所需的短混合时间反映了相关基因与oriT 间的距离。在下图中 oriT右侧画出 A 菌株 thr+ 、leu+ 、thi+基因在拟核上的位置。
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转座子是指能从基因组的一个位置移动到另一个位置的 DNA 片段。Ac 片段能编码转座 酶，可自主移动。DS片段需在转座酶作用下，才可以从原来的位置上切离下来，然后随机 插入到所在染色体的其他位置或其他染色体上。
（1）用________酶将 DS片段构建在 Ti 质粒的T-DNA 片段上，再用含有该重组质粒的 ________转化水稻，自交筛选获得 DS-T-DNA纯合体（甲）。以同样方法获得Ac-T-DNA 纯合体水稻（乙）。
（2）甲、乙杂交获得 Ac/Ds 双因子转座系统水稻，在其后代中筛选到一些淡绿叶突变体。 利用淡绿叶突变体与野生型水稻（甲）进行系列杂交实验，________代获得野生型和 淡绿叶水稻植株分别为 442 株和 130 株，分离比符合3：1，初步推测淡绿叶突变是单 基因的________性突变。将 442 株野生型植株单株收获和播种，后代发生性状分离的 植株占________，则进一步确认上述推测。
（3）为进一步确定突变性状与 Ds 切离转座的相关性，设计 6 种引物（如图 1），对上述 572 株子代的 T-DNA 进行 Ds 转座的 PCR 检测。
①检测原理：Ds 未发生切离的DNA位点，通过引物________可得到400 bp 的扩增产物；Ds 已发生切离的 DNA 位点通过引物________可得到 870 bp的扩增产物。
②扩增产物的电泳结果如图 2，据此判断________类型为淡绿叶突变体。
若A 类型：B 类型：C 类型=_______，则突变性状产生与 Ds 片段的切离转座有关。
γ-氨基丁酸（GABA）是成年动物体中枢神经系统的主要抑制性神经递质。
（1）神经元未受刺激时，细胞膜静息电位为________。通常情况下，当突触前神经元释放的GABA与突触后膜上的________结合后，Cl-通道开放，Cl-顺浓度梯度内流，从而产生抑制性效应。
（2）研究大鼠等哺乳动物（包括人类）胚胎发育早期未成熟神经元时发现，GABA的生理效应与成熟神经元相反。其原因是胞内Cl-浓度显著________于胞外， GABA作为信号引起Cl- ________（填“内流”或“外流”），从而产生兴奋性效应。
（3）在个体发育的不同阶段，神经系统内GABA的通道型受体的特性（既是GABA受体，也是双向Cl-通道）并未改变，GABA的两种作用效应与细胞膜上两种Cl-跨膜共转运体NKCCl和KCC2有关，其作用机制如图1所示。（图中共转运体的大小表示细胞膜上该转运体的相对数量）
据图可知，大鼠成熟神经元中含量相对较低的Cl-共转运体是________。
（4）为探究GABA兴奋性效应对神经元发育的影响。将不同基因分别转入三组大鼠胚胎神经组织。待幼鼠出生后第14天，显微镜下观察神经元突起的数量及长度（图2）。
与对照组相比，实验组幼鼠单个神经元________，由此证明GABA的兴奋性效应保证了神经元正常发育。通过检测实验组EGFP的分布及荧光强度以确定KCC2蛋白的________。
（5）在患神经性病理痛的成年大鼠神经元中也检测到GABA的兴奋性效应，推测该效应与KCC2和NKCC1表达量有关。研究者以“神经性病理痛”模型大鼠为实验组，用________技术检测KCC2和NKCC1的含量。若结果为________，则证实上述推测。
（6）该系列研究其潜在的应用前景为________。
辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。以下叙述不正确的是
A. 组织培养的培养基中需要加入有机营养和植物激素
B. 用高压蒸汽灭菌法处理外植体和培养基
C. ①和②分别表示脱分化和再分化过程
D. 果实细胞的基因型与外植体基因型相同
在核酸分子杂交技术中，常常使用已知序列的单链核酸片段作为探针。为了获得B链作探针，可应用PCR技术进行扩增，应选择的引物种类是
A. 引物1与引物2
B. 引物3与引物4
C. 引物2与引物3
D. 引物1与引物4
牛雄性胚胎中存在特异性H-Y 抗原，可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y 单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述错误的是
A. H-Y 单克隆抗体可由杂交瘤细胞分泌 B. 发生抗原抗体阳性反应的为雄性胚胎
C. 利用筛选出的雄性胚胎做胚胎移植 D. 用H-Y 抗原免疫母牛可获得相应抗体
