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利用基因工程等生物工程技术,可从转基因奶山羊乳汁中分离获得人凝血因子Ⅳ,用于血友...

利用基因工程等生物工程技术,可从转基因奶山羊乳汁中分离获得人凝血因子Ⅳ,用于血友病的治疗。请回答下列问题:

1)目的基因的获取方法不是唯一的,若以mRNA为材料人工合成获得凝血因子Ⅳ基因。其具体方法是___________,构建的基因表达载体应该包括启动子,终止子、____________等。

2)将含有目的基因的表达载体导人奶山羊受精卵后,需要进行鉴定和检测来确定基因的表达情况。检测奶山羊乳汁中是否含有人凝血因子Ⅳ,可采用__________法。除了分子检测外,有时还需要进行________水平的鉴定。

3)已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。在DNA连接酶的作用下构建重组质粒,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端_________ (填不能)连接,理由是_____________

4)若最终转基因奶山羊乳汁中成功表达出人凝血因子Ⅳ,其中涉及的生物技术有___________________

 

在逆转录酶的作用下,以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则合成目的基因 目的基因和标记基因 抗原—抗体杂交 个体生物学 能 因为由这两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的 基因工程,动物细胞培养,早期胚胎培养,胚胎移植等 【解析】 基因工程是现代生物科技中的热点。基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术,按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。 基因工程技术的基本步骤: (1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 (2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 (3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 (4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 (1)通过mRNA人工合成获得凝血因子Ⅳ基因,其具体方法是在逆转录酶的作用下,以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则合成目的基因,构建的基因表达载体应该包括启动子,终止子、目的基因和标记基因等。 (2)检测目的基因是否已转录出了mRNA,可采用分子杂交技术.若要检测羊乳汁中是否含人凝血因子Ⅳ,需用抗原-抗体杂交法,若有杂交带出现,表明目的基因已形成蛋白质产品,了分子检测外,有时还需要进行个体生物学水平的鉴定。 (3)分析可知,限制性内切酶I和限制性内切酶Ⅱ切割形成的粘性末端相同,故在DNA连接酶的作用下,该两种限制酶切割后形成的黏性末端能连接。 (4)若最终转基因奶山羊乳汁中成功表达出人凝血因子Ⅳ,其中涉及的生物技术有基因工程,动物细胞培养、早期胚胎培养,胚胎移植等。
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请回答下列有关微生物培养,应用和保存以及物质提取的问题:

1)微生物培养过程常用的对涂布器进行灭菌的方法是_____________。培养酵母菌常用到的培养基是____(填名称)。

2)从土壤中分离尿素分解菌的过程中,应向以尿素为唯一氮源的培养基中加入____________指示剂。

3)对于需要临时保藏的菌种,首先要将菌种接种到试管的固体斜面培养基上,等菌落长成后,再_________。对于需要长期保存的菌种,可以采用__________的方法。

4)从橘皮中提取橘皮精油常用的方法是___________法,从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是_______法。

 

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研究人员研究漂浮植物满江红、浮叶植物萍蓬草、挺水植物菖蒲和沉水植物金鱼藻对某富营养化水生生态系统的净化效果,分别种植四类植物后,测得该富营养化水生生态系统中总氮浓度变化结果如下图所示。请回答下列问题:

1)这些水生植物的空间分布形成群落的________________结构。

2)满江红是一年生草本植物,一年内输入满江红的能量除了流向其他生物外,其他能量的去向有____________________

3)水体富营养化造成满江红大量繁殖,对金鱼藻生长影响最大,其原因是_______________________

4)据图分析,去除总氮效果最好的是____________,去除率最大达到__________________。除了种植水生植物外,请你根据生态学相关知识,再提出一条具体治理措施:__________________________

 

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为研究油菜素内酯(BR)在植物向性生长中对生长索(IAA)的作用,科研人员以拟南芥为材料进行了如下实验。请回答下列问题:

1BR作为一种植物激素,它与其他植物激素的关系是________________

2)科研人员在黑暗条件下用野生型和BR合成缺陷突变体拟南芥幼苗进行实验,三组幼苗均水平放置,其中一组野生型幼苗施加外源BR,另外两组不施加,测定014h内三组幼苗胚轴和主根的弯曲度,结果如下图所示。

若测得主根向下弯曲,则胚轴弯曲的方向向______________。施加外源BR的野生型幼苗的胚轴、主根出现最大弯曲度的时间是_______________,该BR合成缺陷突变体植株出现最大弯曲度的时间较其他两组出现最大弯曲度的时间晚。上述实验结果能说明_____________________

3IAA可引起G酶基因表达,G酶可催化无色底物生成蓝色产物。科研人员将转入了G酶基因的野生型和BR合成缺陷突变体植株的主根用含有无色底物的溶液浸泡一段时间后,观察到野生型植株主根的蓝色产物分布于分生区和伸长区,而BR合成缺陷突变体植株主根的蓝色产物仅分布于分生区,说明______________,进而推测BR能够促进IAA的极性运输。

4)为验证上述推测,可进一步检测并比较野生型和BR合成缺陷突变体植株主根细胞中IAA极性运输载体基因的表达量,若______________________________,则支持上述推测。

 

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科学家发现,单独培养的大鼠神经元能形成自突触(见图甲)。用电极刺激这些自突触神经元的胞体可引起兴奋,其电位变化结果如图乙所示。请回答下列问题:

1_______________是神经元产生和维持一68mV膜电位的主要原因,此时膜内的Na+浓度比膜外的____________(填低)。

2)胞体受刺激后,电位变化出现第一个峰值的原因是______________使兴奋部位膜内侧阳离子浓度高于膜外侧。此时产生的兴奋以_________________的形式沿着神经纤维传导至轴突侧支的突触小体,然后引起________________,产生第二个峰值。

3)谷氨酸也是一种神经递质,与突触后膜受体结合后,能使带正电的离子进入神经元,导致其兴奋。利用谷氨酸受体抑制剂(结合上述实验),证明大鼠自突触神经元的神经递质是谷氨酸。写出实验思路并预测实验结果。

实验思路:________________________________________________________________

预测结果:________________________________________________________________

 

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控制果蝇直毛和非直毛的等位基因Rr位于X染色体上,控制长翅、残翅的等位基因Bb位于常染色体上。现有一只直毛长翅果蝇与一只非直毛长翅果蝇交配,F1雄蝇中有1/8为非直毛残翅果蝇。请回答下列问题:

1)亲本果蝇的基因型是_______F1雌蝇中隐性纯合子出现的概率为_____

2)亲本中直毛长翅果蝇的性别:_______(填雄性”“雌性不能确定),判断理由是__________________

3)请利用F1果蝇为实验材料,验证果蝇的直毛基因对非直毛基为显性。写出实验思路并预测实验结果。

实验思路:_______________________

预期实验结果:________________

 

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