Question

生物柴油是一种可再生清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。科学家发现，在微生物 M 产生的脂肪酶的作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。

（1）欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌，应配制以_______________为唯一碳源的培养基，这种培养基从功能上看属于____培养基。

（2）在微生物培养过程中，灭菌与消毒的主要区别是灭菌能够杀死物体内外____。常用____法对玻璃器皿进行灭菌。

（3）若测得稀释倍数为 10⁶ 的培养基中的平板上，菌落数的平均值为 254，则每毫升样品中的菌株数是（涂布平板时所用稀释液的体积为 0．1mL）_____。用该方法统计的醋酸菌数目会比活菌的实际值_____（填小或大），原因是____________________________________。

（4）为降低生物柴油生产成本，可利用______________________________技术使脂肪酶能够重复使用。

Answer

植物油 选择 所有微生物（包括芽孢和孢子） 干热灭菌 2.54×109个 小 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落 固定化酶

【解析】

微生物的营养物质：水、碳源、氮源、无机盐、生长因子。 培养基灭菌采用的最适方法是高压、高温、蒸汽灭菌法；游离态酶的稳定性差，并且难以回收利用，而固定化酶不但能够重复利用，还能提高产品质量。

（1）筛选产脂肪酶的微生物M时，应该使用只有目的菌能够生存的，其他微生物不能生存的选择培养基，故培养基中应该添加植物油作为唯一碳源；从功能上看，这种培养基属于选择培养基。

（2）在微生物培养过程中，灭菌和消毒的主要区别是灭菌能够杀死物体内外所有的微生物的芽孢和孢子；玻璃器皿常采用的灭菌方法为干热灭菌。

（3）该组同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为254，则每毫升样品中的菌株数=254×106÷0.1=2.54×109个；因当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落，故用该方法统计的醋酸菌数目会比活菌的实际值偏小。

（4）由于固定化酶能使能够重复使用，因而可降低生物柴油生产成本。