Question

根据某基因上游和下游的碱基序列，设计合成了用于该基因PCR的两段引物（单链 DNA)。引物与该基因变性DNA(单链DNA)结合为双链DNA的过程称为复性。下图是两引物的T_m（引物熔解温度，即50%的引物与其互补序列形成双链DNA分子时的温度）测定结果，下列叙述错误的是

A.通常引物1和引物2不能有碱基互补配对关系

B.两引物分别是子链延伸的起点，并可以反复利用

C.若两引物的脱氧核苷酸数相同，推测引物2的GC含量较高

D.复性所需温度与时间，取决于引物的长度、碱基组成及其浓度等因素

Answer

B

【解析】

PCR技术：
1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。
2、原理：DNA复制。
3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。
4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）
5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

A、通常引物1和引物2不能有碱基互补配对关系，否则引物之间会相互结合，A正确；
B、两引物分别与DNA的两条单链结合，是子链延伸的起点，但引物不能重复利用，B错误；
C、DNA分子中C和G之间有3个氢键，A和T之间有2个氢键，因此C和G的含量越高，DNA分子越稳定。若两引物的脱氧核苷酸数相同，由于引物2的Tm高，则由此可推测引物2的GC含量较高，C正确；
D、复性所需温度与时间，取决于引物的长度、碱基组成及其浓度等因素，D正确。
故选B。