Question

小麦含有α﹣淀粉酶和β﹣淀粉酶两种淀粉酶，其中α﹣淀粉酶耐热不耐酸，70℃加热 15min 仍能保持活性，pH＜3．6 会失活，而β﹣淀粉酶耐酸不耐热，70℃加热 15min 会失活，在测定种子中淀粉酶的活性时，让其中的一种酶失活就能测出另一种酶的活性，如表为某实验小组测定小麦淀粉酶活性的实验步骤，回答下列问题：

操作步骤	操作项目	α﹣淀粉酶活力测定	总淀粉酶活力 测定
A1	A2	B1	B2
①	淀粉酶原液/ml	1．0	1．0	0	0
②	操作步骤 X	X
③	淀粉酶原液/ml	0	0	1．0	1．0
④	预保温	将各试管和淀粉酶置于 40℃恒温水浴保温 l0min
⑤	pH＝5．6 的缓冲液/ml	1．0	1．0	1．0	1．0
⑥	NaOH 溶液/ml	4．0	0	4．0	0
⑦	1%的淀粉溶液	2．0	2．0	2．0	2．0
⑧	保温	置于 40℃恒温水浴保温 l0min
⑨	NaOH 溶液/ml	0	4．0	0	4．0

（1）淀粉酶能催化淀粉水解为还原糖，淀粉酶的活性可以用_____来表示，α﹣淀粉酶耐热不耐酸，β﹣淀粉酶耐酸不耐热，造成两种酶的性质不同的直接原因是_____。

（2）第②步的操作是_____

（3）第⑥步和第⑨步均加入了 NaOH 溶液，两次加入 NaOH 溶液的目的是不同的，试阐述其目的分别是什么？_____。

Answer

单位时间内淀粉的水解量或单位时间内还原糖的生成量 两种酶的蛋白质空间结构存在差异 70℃加热15min 第⑥步中加入NaOH溶液的目的是使酶失活，设置对照组；第⑨步中加入NaOH溶液的目的是使酶失活，以控制反应时间

【解析】

小麦种子中含淀粉丰富，萌发时形成大量淀粉酶；在测定种子中淀粉酶的活性时，让其中的一种酶失活就能测出另一种酶的活性；根据表格分析，该实验若测定α-淀粉酶催化淀粉水解的最适温度，要使取得的酶液中的β-淀粉酶失去活性，而根据α-淀粉酶较耐热，β-淀粉酶不耐热的特性，在70℃条件下将获得的酶液处理15 min，可使酶液中的β-淀粉酶失活；根据α-淀粉酶不耐酸，在pH＜3.6时可迅速失活，而β-淀粉酶耐酸的特性，只需将步骤一中制取的酶液置于pH＜3.6的环境中短暂时间，使α-淀粉酶失去活性，即可得到β-淀粉酶保持活性而α-淀粉酶失活的酶溶液。

（1）淀粉酶能催化淀粉水解为还原糖，因此淀粉酶的活性可以用单位时间内淀粉的水解量或单位时间内还原糖的生成量来表示；淀粉酶的化学本质是蛋白质，两种酶的性质不同，其直接原因是两种酶的蛋白质空间结构存在差异。

（2）淀粉酶原液含有a-淀粉酶和β-淀粉酶两种淀粉酶，要测定a-淀粉酶的活性，需要使β-淀粉酶失活，根据两种酶的特点，a-淀粉酶耐热，70℃加热15min仍能保持活性，而β-淀粉酶不耐热，70℃加热15min会失活，因此步骤②为70℃加热15min。

（3）该实验步骤⑥中在A1和B1组中加入NaOH溶液的目的是使酶失活，使A1和B1组作为对照组；而实验步骤⑨在A2和B2组中加入NaOH溶液的目的是使酶失活，以控制反应时间。