Question

基因工程载体是DNA重组技术使用的基本工具。回答下列问题

（1）大肠杆菌的质粒常被用来做基因工程中的载体，其主要优点是_______________（至少两项）。基因工程中常使用的载体除质粒外，还有_______________（至少两项）。

（2）在进行基因工程操作中，真正被用作载体的质粒都是在天然质粒的基础上进行人工改造过的。在构建基因表达载体时，通过人工改造，基因表达载体中除了含有目的基因外，还必须有_____________________。构建目的基因表达载体的目的一方面是使目的基因在受体细胞中_______________，并遗传给下一代；另一方面，使目的基因能够_______________，从而得到转基因产品或生物。

（3）利用乳腺生物反应器来生产基因工程药物时，与药用蛋白基因连在一起的是__________启动子，这样才能使该目的基因在乳腺细胞中表达。

（4）农杆菌转化法常用的载体为____________，构建此表达载体时，要将目的基因插入到质粒的___________上，这样就能够通过农杆菌的转化作用使目的基因进入植物细胞并插入到染色体中DNA上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。

Answer

分子小，能自主复制，有标记基因，有多个酶切位点 λ噬菌体的衍生物、动植物病毒 启动子、终止子和标记基因 稳定存在 表达并发挥作用 乳腺蛋白基因 Ti质粒 T—DNA

【解析】

运载体是基因工程进行所必须的工具，在进行目的基因的转移时，常常需要将目的基因与运载体相结合，一般常用的运载体有质粒，噬菌体和动植物病毒。目的基因建构时，要保证形成的重组载体具有目的基因、启动子、终止子和标记基因，识记基因工程的基本工具和操作步骤是本题的解题关键。

（1）基因工程中常使用的载体为质粒，质粒的优点有：分子小，分子上有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入，质粒可在细胞中进行自我复制，质粒DNA分子上有特殊的标记基因，供重组DNA的鉴定和选择；除质粒外，λ噬菌体的衍生物、动植物病毒也是常用的基因工程载体；

（2）构建的表达载体应包括启动子、终止子，以便驱动和停止转录，标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因；构建目基因表达载体后，通过复制原点，目的基因一方面在受体细胞中稳定存在，可以遗传给下一代；同时，在启动子的调控下，目的基因能够表达和发挥作用，从而得到转基因产品或生物；

（3）如果要利用乳腺生物反应器来生产基因工程药物，启动子必须是乳腺蛋白基因的启动子，这样才能使该目的基因在乳腺细胞中表达；

（4）农杆菌转化法常用的载体为Ti质粒，它含有一段可转移的DNA，这段DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体染色体的DNA上；构建表达载体时，将目的基因插入到质粒的T—DNA上，就能够使目的基因进入植物细胞并插人到染色体的DNA上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。