Question

苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。

(1)将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有___________种DNA片段。

(2)图中②表示HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得______种重组质粒；如果换用Bst l与BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得___________种重组质粒。

(3)目的基因插入质粒后，不能影响质粒的___________。

(4)图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的T—DNA导人植物细胞，并防止植物细胞中_____对T—DNA的降解。

(5)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞___________。

(6)生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的___________基因频率的增长速率。

Answer

4 2 1 复制 DNA水解酶 表面无相应的特异性受体 抗性

【解析】

分析题图：图示表示转Bt毒蛋白基因植物的培育过程，其中①是含有目的基因的外源DNA分子，其中含有限制酶HindⅢ、BamHⅠ和BstⅠ的切割位点，且BamHⅠ和BstⅠ的识别序列相同；②表示基因表达载体的构建过程；③表示采用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞的过程；④表示目的基因的表达。

（1）由于上述两种酶形成的末端不一样，所以被两种不同的限制酶切割之后所形成的片段有AA、AB、BA、BB四种切法形成的四种片段。（A表示HindⅢ，B表示BamHⅠ）

（2）同时被两种限制酶切割有两种不同的目的基因，即AB和BA，所以重组质粒有两种。Bst l与BamHⅠ酶切割的末端一样，所以同时用这两种限制酶切割只能形成一种目的基因，所以只能形成一种重组质粒。

（3）质粒要进行复制才能更多的表达出产物，所以重组之后要能复制。

（4）酶具有专一性，对T—DNA的降解酶为DNA水解酶。

（5）生物的细胞表面的受体具有特异性，人类肠上皮细胞没有昆虫肠上皮细胞表面的特异受体。所以该毒素蛋白对人类的风险相对较小。

（6）自然选择是普遍存在的，纯种种植自然选择会使害虫抗性基因频率快速增长。所以混合种植降低害虫的抗性基因频率的增长速率。