Question

人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因奶牛，并通过乳腺生物反应器生产HSA，其主要技术流程如下图所示：

回答下列问题：

（1）如上图所示，供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞，其原因是 _______________________________________________________________。

（2）SRY-PCR法性别鉴定的基本程序是：提取牛胎儿成纤维细胞的DNA，经PCR反应体系扩增SRY基因（Y染色体上特有的性别决定基因）片段，然后对扩增产物进行检测。

要大量获得SRY基因，PCR扩增时需要加入两种引物：__________________（选填“引物I”、“引物II”、“引物III”、“引物IV”），原因是DNA聚合酶只能从核苷酸链的______________（2分，选填“5’端”或“3’端”）开始延伸DNA链，用两种引物才能确保______________。除引物外，PCR反应体系中还包含缓冲液、模板DNA、____________和 ____________等成分。通过SRY-PCR法进行性别鉴定，可获得更多的转HSA基因________牛，以便其通过乳腺生物反应器生产人血清白蛋白。

（3）在胚胎移植操作中，应对供体和受体母牛进行_____________处理，目的是使供体和受体处于相同的生理状态，使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致。由此可见，胚胎移植的实质是_____________________________________________。

Answer

十代以内的细胞能保持正常的二倍体核型 引物I和引物IV 3’端 DNA两条链同时被扩增 dNTP 热稳定DNA 聚合酶（Taq 酶） 母 同期发情 早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移

【解析】

据图分析，图示涉及到的技术有基因工程和核移植技术，先将HAS基因与质粒结合形成重组质粒，再将重组质粒导入牛胎儿成纤维细胞；接着将导入目的基因的成纤维细胞的细胞核取出，与去核卵母细胞重组形成重组细胞，培养成早期胚胎后移植到代孕母牛体内，最终获得了转基因母牛。

（1）由于10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型，因此图示供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞。

（2）在PCR技术中，DNA聚合酶只能从核苷酸链的3’端开始延伸DNA链，用两种引物才能确保DNA两条链同时被扩增，因此图中要利用PCR技术扩增SRY基因，应该选择的引物是引物Ι和引物IV。PCR反应体系中，除了有两种引物，还应该有缓冲液、模板DNA、dNTP（原料）和热稳定DNA聚合酶等成分。该实验是通过乳腺生物反应器生产人血清白蛋白，因此最终获得的是转HSA基因母牛。

（3）在胚胎移植操作中，应对供体和受体母牛进行同期发情处理，以使供体和受体处于相同的生理状态，使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致。由此可见，胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。