Question

嗜吡啶红球菌可以将硝酸盐还原成亚硝酸，还能使榨菜在腌制过程中变红；该菌的菌落呈红色、奶酪状、圆形、隆起。研究人员为了初步鉴定变红的榨菜中是否含有嗜吡啶红球菌，进行了相关实验，请回答下列问题：

（1）培养嗜吡啶红球菌的培养基的pH应调至_____________，该步骤应在_____________之前完成。

（2）初步鉴定嗜吡啶红球菌时，先要纯化榨菜中的菌种，纯化时先将榨菜样液用滤膜过滤，滤膜的孔径应_____________ （填“大于”或“小于”）菌种的体积。挑取滤膜上的菌种，接种在平板上培养，常用的接种方法有______。培养微生物时， 常培养一个未接种的培养基，目的是_____________。一段时间后观察平板上的菌落特征，若观察到_____________，则可初步确定变红榨菜中含有嗜吡啶红球菌。

（3）为了进一步确定变红榨菜中含有嗜吡啶红球菌，可挑取上述平板菌落中的菌种接种在含有_____________ 的液体培养基中培养，一段时间后用_____________ 法检测亚硝酸盐的含量。

Answer

中性或微碱性 灭菌 小于 平板划线法和稀释涂布平板法 检测培养基灭菌是否合格 平板上的菌落呈红色、奶酪状、圆形、隆起 硝酸盐 比色

【解析】

1、培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。
2、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）嗜吡啶红球菌为细菌的一种，培养细菌的培养基的pH应调至中性或微碱性，该步骤应在灭菌之前完成。

（2）滤膜的孔径应小于菌种的体积，才能保证过滤后在滤膜上得到菌种。挑取滤膜上的菌种，接种在平板上培养，常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。为检测培养基灭菌是否合格，常培养一个未接种的培养基，看其上面是否有菌落出现。根据题意可知，嗜吡啶红球菌的菌落呈红色、奶酪状、圆形、隆起等，所以可根据上述菌落特征判断培养基上是否有嗜吡啶红球菌。即一段时间后，若观察到平板上的菌落呈红色、奶酪状、圆形、隆起，则可初步确定变红榨菜中含有嗜吡啶红球菌。

（3）嗜吡啶红球菌可以将硝酸盐还原成亚硝酸，所以为了进一步确定变红榨菜中含有嗜吡啶红球菌，可挑取上述平板菌落中的菌种接种在含有硝酸盐的液体培养基中培养，一段时间后用比色法检测亚硝酸盐的含量。