Question

人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：

请回答：

（1）过程①代表的是________。

（2）过程②构建A基因表过载体时，必须使用_____________和_________两种工具酶。

（3）过程③采用的实验技术是_______，获得的X是___________。

（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的_________所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行__________比较，或用图中的__________________________________进行特异性结合检测。

Answer

逆转录 限制性核酸内切酶（或限制酶） DNA连接酶 细胞融合 杂交瘤细胞 A蛋白 核酸（基因）序列 抗A蛋白的单克隆抗体

【解析】

据图分析可知，①表示逆转录过程，②表示目的基因的获取，③是细胞融合。动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，最主要的用途是制备单克隆抗体。单克隆抗体的制备必须用已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，经过两次筛选才能选出产生所需要单一抗体的杂交瘤细胞，然后用动物细胞培养技术在体外液体培养基中培养。

（1）逆转录过程是在逆转录酶的作用下合成DNA过程。

（2）基因表达载体的构建必须用限制酶和DNA连接酶。

（3）过程③是动物细胞融合，经融合的细胞有骨髓瘤细胞自身融合，浆细胞自身融合，骨髓瘤细胞与浆细胞融合三种融合细胞，经筛选后获得的X是杂交瘤细胞。

（4）该病毒表面的A蛋白为主要的抗原，故而可采用通过基因工程生产的A蛋白制备疫苗；确诊时为判断该病毒是否为题目中的RNA病毒，可以进行核酸序列的比对，也可以利用单克隆抗体具备特异性，利用抗A蛋白的特异性单克隆抗体通过能否发生抗原-抗体反应来判断病毒表面是否有A蛋白的存在，进而确定是否为目的RNA病毒。