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黄瓜花叶病毒(CMV)是能侵染多种植物的RNA病毒,可危害番茄的正常生长并造成减...

黄瓜花叶病毒(CMV)是能侵染多种植物的RNA病毒,可危害番茄的正常生长并造成减产。研究人员通过农杆菌介导将该病毒外壳蛋白的cDNA导入番茄植株中,成功获得抗CMV的番茄植株。

1)获得CMVRNA后,在__________的催化下才能合成CMV外壳蛋白的cDNA

2)获得cDNA后,需先通过一定方法将其插入到农杆菌的__________片段中,然后将番茄子叶切段与该农杆菌共同培养,以实现对番茄细胞的转化。

3)将经共同培养后的番茄外植体接种于含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上培养一段时间,只有部分外植体生出愈伤组织。研究人员据此确定这些生出愈伤组织的外植体都已成功导入了cDNA,你认为他们做出以上判断的理由是_________________

4)要想确定转基因番茄已经成功表达出CMV外壳蛋白,需要进行____________实验。

5)若要验证转基因番茄具有较好的抗CMV能力,请写出实验设计思路__________。转基因番茄自交,子代中抗性植株与敏感植株数量之比接近3 1,由此可以得出的结论是_________(答出两点)。

 

逆转录酶 Ti质粒的T-DNA 重组表达载体同时含有卡那霉素和青霉素抗性基因,只有成功导入了重组质粒的外植体才能在含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上生出愈伤组织 抗原-抗体杂交 用等量强致病力的CMV分别感染转基因番茄与未转基因的番茄(普通番茄),在相同且适宜的条件下培养一段时间,观察它们对CMV的抗性 目的基因整合到受体细胞的一条染色体上,获得的转基因亲本为杂合子 【解析】 基因工程技术的基本步骤: 1、目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 2、基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 3、将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不同。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 4、目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质—抗原-抗体杂交技术;④个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 (1)以RNA为模板合成DNA的过程为逆转录,该过程需要逆转录酶的催化。 (2)农杆菌转化法的原理是:农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体DNA上。因此,获得cDNA后,需先通过一定方法将其插入到农杆菌的Ti质粒的T-DNA片段中,然后将番茄子叶切段与该农杆菌共同培养,以实现对番茄细胞的转化。 (3)重组表达载体同时含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因,只有成功导入了重组质粒的外植体才能在含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上生出愈伤组织,据此可知生出愈伤组织的外植体都已成功导入了cDNA。 (4)检测目的基因是否表达产生相应的蛋白质,需要进行抗原-抗体杂交实验。 (5)若要验证转基因番茄具有较好的抗CMV能力,应进行个体水平上的鉴定,自变量为番茄植株的种类,即用等量强致病力的CMV分别感染转基因番茄与未转基因的番茄(普通番茄),在相同且适宜的条件下培养一段时间,观察它们对CMV的抗性。转基因番茄自交,子代中抗性植株与敏感植株数量之比接近3:1,符合基因分离定律,由此可以得出的结论是目的基因整合到受体细胞的一条染色体上,获得的转基因亲本为杂合子。
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考点分析:
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红耳龟原产美洲,作为宠物引入我国。由于宠物弃养和放生行为,红耳龟野外种群数量逐渐增大,对当地的生物多样性造成威胁。为研究红耳龟入侵对当地生态系统的影响,科研人员对当地红耳龟的种群数量和食性进行了调查。请回答下列问题:

1)红耳龟属于生态系统成分中的消费者,其同化的能量,一部分在________过程中散失,一部分可用于________

2)红耳龟的_______及迁入率和迁出率是决定其种群密度和种群大小的直接因素。调查描述、解释和预测红耳龟种群数量的变化时,常常需要建立_____模型。

3)研究人员调查了该地区龟鳖类的种群个体数量,结果如下表所示。

 

红耳龟

乌龟

中华花龟

中华鳖

蛇鳄龟

数目(只)

148

20

8

4

1

 

调查结果发现,目前该地区龟鳖类的优势种是_________。由于红耳龟的入侵,导致当地的群落结构发生明显改变,这种变化过程称为________

4)为研究红耳龟的食性,研究人员解剖了红耳龟和本地龟类--中华花龟,统计它们胃内残余食物种类及出现次数,发现中华花龟胃内仅有久雨花科、苋科和鱼类三种食物。红耳龟的残余食物统计结果如图所示。

①红耳龟与中华花龟的种间关系属于______,判断依据______________

②红耳龟入侵后,得以迅速繁殖,原因可能是_______________________

③红耳龟的捕食行为还可能会引起本地的鱼类、贝类等生物的种群密度下降,严重时会使当地的物种________降低,影响该生态系统的________能力。

 

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神经细胞间兴奋的传递依赖突触。无脊椎动物枪乌贼的星状神经节具有巨大的化学突触结构(巨突触),可用微电极来记录突触前动作电位和突触后电位变化(如图1)。以下是关于递质释放机制的相关研究。

1)在图1中的突触结构中,突触前神经元兴奋后,由突触前膜释放的________作用于突触后膜的________,导致突触后神经元兴奋。

2)河豚毒素(TTX)是一种钠离子通道阻断剂。用TTX处理突触前神经纤维,然后每隔5min施加一次刺激,分别测量突触前和突触后神经元的电位变化,结果如图2。推测TTX导致突触前和突触后神经元电位发生变化的原因是___________________

3)在上述实验过程中,研究者检测到,在使用TTX后突触前膜处的Ca2+内流逐渐减弱,由此推测“突触前动作电位通过提高突触小体内Ca2+浓度来促进神经递质的释放”。研究者利用图1所示标本进行如下实验,获得了支持上述推测的实验结果。

实验材料:BAPTA  ——是一种Ca2+螯合剂,能够快速与钙离子发生结合,从而阻断钙离子与相应分子的结合“笼锁钙”——是一种缓冲液,暴露在强紫外线下会释放钙离子;强紫外线不影响正常神经纤维兴奋。

实验过程及结果:

第一组:对突触前神经纤维施加适宜电刺激。

实验结果:先检测到突触前动作电位的发生,之后检测到突触后电位的变化。

第二组:先向突触小体注射适量BAPTA,接着在突触前神经纤维施加适宜电刺激。

实验结果:_________________________

第三组:_________________________(写出实验过程)。

实验结果:______________________

 

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玉米中因含支链淀粉多而具有黏性(由基因D控制)的籽粒和花粉遇碘变棕色;含直链淀粉多不具有黏性(由基因d控制)的籽粒和花粉遇碘变蓝色。Dd完全显性,位于3号染色体上。科研人员发现可稳定遗传的黏性玉米品种甲具有抗病基因E和耐干旱基因H,其中H基因位于5号染色体上。基因位置如下图所示:

将玉米品种甲与玉米品种乙进行测交实验,F1自交,检测F2群体中不同植株的基因型,发现不同基因型个体数如下表。

EE

Ee

ee

HH

Hh

hh

39

120

81

59

121

60

 

请回答下列问题:

1)玉米耐干旱基因的遗传遵循__________定律,判断的依据是_________。玉米抗病性状和黏性性状的遗传不遵循自由组合定律,判断的依据是____________________

2)研究人员通过数学统计发现F2群体中EEEeee基因型个体的数量比总是132,并且发现F1产生的雌配子育性正常,进而推测带有E基因的花粉成活率低。请利用已有的品种甲、乙、F1,设计实验验证上述推测,要求写出实验步骤并预期实验结果(不考虑交叉互换)。

方法一、   

实验步骤:____________________________

实验结果:____________________

方法二、

实验步骤:_______________________

实验结果:________________________

3)进一步研究发现品种乙3号染色体上有两个紧密连锁在一起的基因P1P2(如图),P1编码抑制花粉发育的毒性蛋白,P2编码能解除该毒性蛋白作用的保护性蛋白。品种甲3号染色体上无基因P1P2

①据此可知,F1带有E基因花粉成活率低的原因是P1在减数第一次分裂时期表达,而P2可能在_________细胞中表达。

P1P2被称为自私基因,其“自私性”的意义是使_________更多地传递给子代。

 

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科学家研究发现:在强光下,激发态叶绿素会与氧分子反应形成单线态氧而损伤叶绿体,然而类胡萝卜素可快速淬灭激发态叶绿素,起到保护叶绿体的作用。下图是夏季连续两昼夜内,某杏树CO2吸收量和释放量的变化曲线图。S1S5表示曲线与横轴围成的面积。请据图回答下列问题:

1)图中MN段杏树叶肉细胞合成ATP的场所有__________,造成MN段波动的主要外界因素是__________

2)图中B点时,该杏树的叶肉细胞中光合速率______呼吸速率(填“大于”“小于”或“等于”)。

3)经过这两昼夜,该杏树仍正常生长,则有机物的积累量在图示_____(填字母)时刻达到最大值。图中S2明显小于S4,造成这种情况的主要外界因素最可能是__________,图中FGCO2吸收量下降,造成这一变化的主要原因是_________

4)在强光条件下,与正常植株相比,缺乏类胡萝卜素的突变体的光合速率_______(填“上升”“不变”或“下降”),原因有______________________________

 

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为探究适宜环境下,固定容积的培养液中酵母菌种群数量变化规律,研究者进行了相关实验。下列叙述错误的是(   

A.利用血细胞计数板计数时滴于盖玻片边缘的多余的培养液要用滤纸吸掉,否则引起计数结果偏大

B.生长旺盛期的培养液下层比上层酵母菌数量多

C.涂布平板法计数可用接种等量无菌水组做对照

D.涂布平板法统计的酵母菌数目会比实际值略大

 

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