Question

聚乙烯醇（PVA）是一种人工合成的水溶性的高分子聚合物，广泛用于纺织、印染、化纤等领域，由于其降解周期长，给环境造成严重的污染，实验小组筛选出PVA降解菌，对于含PVA废水土壤的处理具有十分重要的意义，回答下列问题：

（1）实验室分离PVA降解菌时应当以_____________作为唯一碳源，除此之外还需要加入的营养成分包括_______________________________，PVA降解菌主要是一些细菌类生物，因此制备培养基时应将培养基的pH调节至__________________。

（2）从含有PVA废水的土壤取样后，一般要先进行选择培养，其目的是___________________，选择培养时所用的培养基从物理性质上划分属于___________ 培养基。

（3）显微镜计数法对微生物进行计数时需要用到的工具是_______________，利用稀释涂布平板法计数测得的微生物的数量往往比实际值___________（填“偏大”或“偏小”），这两种微生物计数方法的区别是______________________________________。

Answer

PVA 氮源、水和无机盐 中性或微碱性 获得数目较多的PVA降解菌 液体 血细胞计数板（血球计数板） 偏小 显微镜计数法统计的是全部微生物的数量，而稀释涂布平板法只能统计活菌的数量

【解析】

1．选择培养基是根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。
2．统计菌落数目的方法
（1）显微镜直接计数法：①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌。
（2）间接计数法（活菌计数法）
①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②操作
a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性。
b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。
③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。

（1）分离PVA降解菌时应当以PVA作为唯一碳源，培养基上除了碳源外，还需要添加氮源、水和无机盐，由于PVA降解菌主要是一些细菌类生物，培养细菌时一般将培养基调至中性或微碱性。

（2）从含有PVA废水的土壤取样后，一般要先进行选择培养，选择培养的目的是获得数量较多的PVA降解菌，即富集培养或扩大培养，所用的培养基是液体培养基。

（3）显微镜计数法对微生物进行计数时需要用到的工具是血细胞计数板（血球计数板），利用稀释涂布平板法计数测得的微生物的数量往往比实际值偏小，原因是当多个细菌靠近时其形成的菌落可能连接在一起。这两种微生物计数方法的区别是显微镜计数法统计的是全部微生物的数量，而稀释涂布平板法只能统计活菌的数量。