Question

苹果酒风味清爽，且具有保健养生的功效。用新鲜苹果榨取果汁并制作果酒的简要流程如下：

（1）过程②分离酵母菌应采用________(选择/鉴别)培养基，配制好的培养基灭菌方法为________。扩大培养的目的是__________________________________。

（2）过程③获得固定化酵母细胞常采用________法，选择此方法的原因是_______________。如果反应物是大分子，应采用________技术。

（3）工业生产中，制备固定化酵母细胞的实验步骤是：酵母细胞的活化→配制CaCl₂溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。

Ⅰ：影响实验成败的关键步骤是_______________________________________。

Ⅱ：该实验中CaCl₂溶液的作用是_____________________________________。

Answer

选择 高压蒸汽灭菌 增加目的菌（酵母菌）的浓度 包埋法 细胞体积较大，难以被吸附或结合 固定化酶技术 配制海藻酸钠溶液 使胶体聚沉

【解析】

固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学的方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。固定化酶优点是使酶既能与反应物接触，又能与产物分离，还可以被反复利用。固定化细胞优点是成本更低，操作更容易，可以催化一系列的化学反应。

（1）过程②分离酵母菌应使用选择培养基，保证从众多的菌体中选择出酵母菌，配制好的培养基通常用高压蒸汽灭菌法灭菌。通过扩大培养可以使目的菌的数量增多，这里是为了增加酵母菌的数量。

（2）过程③获得固定化酵母细胞常采用包埋法，如果希望反复使用这些固定化酵母细胞，一定要避免其他微生物的污染，选择此方法的原因是细胞体积较大，难以被吸附或结合。如果反应物是大分子物质可以使用化学方法结合的酶使酶既能与反应物接触，又能与产物分离，即一般采用固定化酶技术。

（3）固定化酵母细胞的实验步骤是：酵母细胞的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞，其中配制海藻酸钠溶液是影响实验成败的关键步骤，该实验中CaCl2溶液的作用是使胶体聚沉，从而形成凝胶珠。