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为增加油菜种子的含油量,研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连,...

为增加油菜种子的含油量,研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连,导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。

1)研究人员依据基因的已知序列设计引物,采用__________技术从陆地棉基因文库中获取酶D基因,从拟南芥基因文库中获取转运肽基因。在上述引物设计时,分别在引物中加入上图所示酶的识别序列,这样可以用____________________酶处理两个基因后,得到____________端(填图中字母)相连的融合基因。

2)将上述融合基因插入右图所示Ti质粒的TDNA中,构建_______________并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含______________的固体平板上培养得到单菌落,再利用液体培养基震荡培养,可以得到用于转化的浸染液。

3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间,此过程的目的是_________________________,进一步筛选后培养获得转基因油菜。

4)提取上述转基因油菜的mRNA,在____________酶的作用下获得cDNA,再依据融合基因的DNA片段设计引物进行扩增,对扩增结果进行检测,可判断融合基因是否________

 

PCR ClaⅠ(限制酶)和DNA连接 A、D 表达载体(或“重组质粒”) 四环素 利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞 逆转录 转录 【解析】 1、基因文库包括cDNA文库、基因组文库等。某个群体包含一种生物所有的基因的文库叫基因组文库,而用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA片段属于cDNA文库。 2、限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。同种限制酶切割能够产生相同的黏性末端,便于质粒和目的基因连接。 (1)扩增目的基因常用PCR技术。切割获得酶D基因和转基因肽基因时,应该用同种限制酶,以获得相应的黏性末端。因此,可用ClaⅠ限制酶和DNA连接酶处理两个基因后,得到A、D端相连的融合基因。 (2)将上述融合基因插入右图所示Ti质粒的T-DNA中,构建基因表达载体即重组质粒并导入农杆菌中。由于质粒上含有四环素抗性基因作为标记基因,所以将获得的农杆菌接种在含四环素的固体平板上培养得到单菌落。 (3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间,此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞。 (4)提取上述转基因油菜的mRNA,在逆转录酶的作用下获得cDNA,再依据融合基因的DNA片段设计引物进行扩增,对扩增结果进行检测,可判断融合基因是否完成转录。
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考点分析:
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我国科学家屠呦呦因发现治疗疟疾的新药物青蒿素而获得2015年诺贝尔医学奖。青蒿素是种无色针状晶体,易溶于有机溶剂,不溶于水,不易挥发,60℃以上容易分解,主要从黄花蒿中提取。近年来又发现青蒿素具有较强的抗肿瘤作用,某科研小组按如下步骤进行了相关实验:

①从黄花蒿中提取青蒿素;

②将等量癌细胞分别接种到4组培养瓶中,适宜条件下培养24h后除去上清液;

③向4组培养瓶中分别加入等量含24816μmol/L青蒿素的培养液,适宜条件下继续培养;

72h后统计并计算各组的细胞增殖抑制率。

回答下列问题:

1)提取青蒿素时不宜使用水蒸气蒸馏法,原因是_________________________________

2)根据青蒿素_________的特点,可采用有机溶剂萃取的方法,现有四氯化碳(沸点765℃)和乙醚(沸点345℃),应选用__________________作为萃取剂,不选用另外一种的理由是____________________

3)萃取青蒿素的过程应采___________加热;加热时常在加热瓶口安装回流冷凝装置,目的是__________

4)科研小组进行上述②-④步骤实验的目的是______________。步骤③中需要设置对照组,对照组的处理方法为____________________________

 

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荨麻草雌雄异株,且经常出现雌雄败育(无花蕊)现象,杂交实验发现,F1总是无花蕊︰雄株︰雌株=211,再将F1雄株和雌株杂交,F2也出现无花蕊︰雄株︰雌株=211。有同学对上述现象做如下图解,请进一步分析回答:

1)以上图解,属于假说一演绎法的_____________环节,其核心内容至少包括:

_________________________

_______________________

③不同对的基因可以自由组合(独立遗传)。另有同学对核心内容中的③提出质疑,你认为对此质疑有道理吗?为什么?________________________________________

2)研究者采用_________育种方法很容易得到了纯合的雄株,准备将此雄株与天然雌株杂交,预测子代的性状及比例是________________

 

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回答下列关于光合作用的问题。

生姜属于耐阴作物,在橘子树底下种植生姜,不仅可以充分利用果树的立体空间为生姜提供遮阳,提高光能和土地利用率,而且还能增加单位面积的经济效益。下图为这两种植物在温度、水分等均适宜的条件下,光合作用速率与呼吸速率的比值(P/R)随光照强度变化的曲线图。

1)图中表示生姜的曲线是________。若24小时中光照与黑暗时间相等,生姜正常生长所需的光照强度应________。光照强度为a时,B植物叶肉细胞光合作用所需CO2来自________

2)某种植物A,经过长期进化形成独特光合作用和特有的固定CO2的方式,如图一和图二所示(图三表示大部分植物光合作用固定CO2的方式)。

植物A在夜间开放气孔吸收CO2,固定CO2形成苹果酸存储于________中,从而导致细胞液酸度上升:而白天气孔关闭,苹果酸脱羧释放CO2用于________。这种特殊的代谢方式,有利于植物生长在___________的地区。以避免白天由于气孔关闭而导致________供应不足。

 

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下图表示人体神经系统对排尿的控制,其中尿道内、外括约肌都是一种环形肌肉,逼尿肌分布于膀胱壁。请据图回答:

1)当膀胱充盈后,人会产生尿意,请用箭头和图中必要文字、字母表示产生尿意的神经传导途径__________________________________。在神经冲动传导过程中,c神经纤维膜内形成向_____________方向的局部电流。

2)当尿液进入尿道后,尿道感受器兴奋,兴奋传入初级排尿中枢,进一步加强排尿中枢的活动,这是一种_________(“正反馈”或“负反馈”)调节。

3)人产生尿意的部位在_________。某人在车祸中下丘脑受到暂时性损伤,出现多尿症状,请分析原因____________________________________

4)大部分同学们不记得小时候尿床的经历,这种短期记忆主要与神经元的活动及神经元之间的联系有关,尤其是与大脑皮层下________有关。但是还有部分同学还记得小时候尿床经历,这种长期记忆可能与_______有关。

 

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研究分泌蛋白的合成及分泌过程中,科学家们做了下列实验。请回答问题:

1)科学家将一小块胰腺组织放入含放射性标记____________的培养液中短暂培养,在此期间放射性标记物被活细胞摄取,并掺入正在合成的蛋白质中。然后,科学家立即洗去放射性标记物,转入不含放射性标记物的培养液中继续培养。实验结果如图所示。随着____________的变化,放射性颗粒数的百分比在不同细胞结构上有规律的变化,据此推测,分泌蛋白转移的途径是_________________________

2)细胞内部产生的蛋白质被包裹于膜泡之中,这些膜泡能够精准的运输。为了确定参与膜泡运输的基因(sec基因),科学家筛选了两种酵母突变体,这两种突变体与野生型酵母电镜照片差异如下:

酵母突变体

与野生型酵母电镜照片的差异

sec12基因突变体

突变体细胞内内质网特别大

sec17基因突变体

突变体细胞内,尤其是内质网和高尔基体间积累大量的未融合小泡

 

据此推测,sec12基因编码的蛋白质的功能是与____________的形成有关。sec17基因编码的蛋白质的功能是____________________________________

 

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