Question

图示某实验小组从土壤中筛选能高效降解地沟油细菌的过程。请回答：

（1）土壤样品应该采集自_______________的土壤中。

（2）图中的细菌培养基中主要物质有水、无机盐、___________、___________，从培养基的物理状态分析，在该培养基的配制过程中，还需要加入_____________。

（3）图中的选择培养基应以______________为唯一碳源。在鉴别培养基中可加入适量的________________（试剂）于平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围的现象是________________，则说明此菌株能够降解地沟油中的脂肪。

（4）若使用稀释涂布平板法对菌液中细菌进行计数，需先将菌液进行_______________，然后将不同浓度的菌液用____________涂布到固体培养基表面，培养后计数。采用这种计数方法统计到的细菌数目往往比实际数目______，原因是________________。为了排除________________，需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照。

Answer

被地沟油污染 碳源 氮源 琼脂 地沟油 苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ 出现透明圈 （一系列）梯度稀释 涂布器 少 两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 实验组中非测试因素对实验结果的影响

【解析】

1、实验室中目的菌株的筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度。pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

2、微生物常见的接种的方法

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。（2）常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。

（1）实验的目的是从土壤中筛选能高效降解地沟油细菌，因此土壤样品应该采集自被地沟油污染的土壤中。

（2）图中的细菌培养基中主要物质有水、无机盐、碳源、氮源。配置固体培养基还需要加入琼脂。

（3）实验的目的是从土壤中筛选能高效降解地沟油细菌，因此该选择培养基应以地沟油为唯一碳源。在鉴别培养基中可加入适量的苏丹Ⅲ或苏丹IV于平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围的现象是出现透明圈，则说明此菌株能够降解地沟油中的脂肪。

（4）若使用稀释涂布平板法对菌液中细菌进行计数，需先将菌液进行梯度稀释，然后将不同浓度的菌液用涂布器涂布到固体培养基表面，培养后计数。采用这种计数方法统计到的细菌数目往往比实际数目少，原因是两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。为了排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照。