Question

回答与酿酒和制醋有关的问题：

（1）普通酵母菌对淀粉的利用能力很弱，且耐酒精度不高。为得到可高效利用淀粉的耐酒精的工程酵母菌菌种，进行如下图所示的操作。

①配制培养基时，按照培养基配方进行称量、溶解、定容、____________、分装、灭菌。

②经甲选择培养基筛选得到__________的酵母菌菌种，再经以淀粉为唯一碳源的乙选择培养基培养，分离、纯化得到可高效利用淀粉的耐酒精工程酵母菌菌种。

③下列对操作 a 和 b 的叙述，正确的是_________________

A、都在超净台上进行，操作时要打开紫外灯和过滤风

B、都需要用接种环挑取单菌落并接种于固体培养基上

C、划线时需要把接种环深入培养基中进行接种

D、操作后均需要在适宜温度的恒温培养箱中培养

（2）某品牌优质食用醋的生产工艺流程如图。

在制作酵母悬液时，为了使工程酵母菌迅速发挥作用，可加适量的__。图中过程 c 完成的标志是发酵瓶中__。过程 d 需要通入经脱脂棉__的空气。

（3）用比色计测定该优质食用醋中的葡萄糖含量，需要制作__的标准曲线。实验中一般不能更换比色杯，若制作标准曲线时的比色杯光程小于测定样液的比色杯光程，测得的样液中葡萄糖含量__(填“偏大”、“偏小”或“无影响”)。

Answer

调pH值 耐酒精 D 蔗糖 停止出现气泡 过滤 葡萄糖浓度与光密度值关系 偏大

【解析】

培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐等。

常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。

常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。

培养基的制备包括：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。

（1）①配制培养基时，需要进行称量、溶解、定容、调pH值、分装、灭菌（高压蒸汽灭菌）。

②首先经甲选择培养基筛选得到耐酒精的酵母菌菌种，再经过基因工程导入淀粉酶基因，再经以淀粉为唯一碳源的乙选择培养基培养，分离、纯化得到可高效利用淀粉的耐酒精工程酵母菌菌种。

③a表示对菌种进行平板划线纯化处理，b表示对菌种进行斜面保藏，

A、进行相关的操作前，把需要使用的用具放在超净台上，要打开紫外灯和过滤风，灭菌处理后再进行平板划线或进行斜面接种，接种时用酒精灯灼烧接种环灭菌即可，A错误；

B、平板划线法接种的不是单个菌落，B错误；

C、划线时把菌种接种在培养基表面，C错误；

D、无论是平板划线还是斜面接种后，均需要在适宜温度的恒温培养箱中培养，D正确。

故选D。

（2）在制作酵母悬液时，加入适量的蔗糖可以为工程酵母菌提供营养，使其迅速发挥作用。图中过程 c表示酒精发酵，酒精发酵的过程中会产生酒精和二氧化碳，其完成的标志是发酵瓶中停止产生气泡。过程d 表示醋酸发酵，该过程需要在有氧条件下进行，需要通入经脱脂棉过滤的空气。

（3）用比色计测定该优质食用醋中的葡萄糖含量，首先用蒸馏水配置一系列浓度梯度的葡萄糖标准溶液，与蒽酮试剂反应后，用比色计测定，并制作葡萄糖浓度与光密度值关系的标准曲线。然后，进行样品处理：将待测样品通过活性炭脱色，排除酒原有颜色的干扰。然后进行样品的测定与计算。若制作标准曲线时的比色杯光程小于测定样液的比色杯光程，会导致测得的样液中葡萄糖含量偏大。