Question

目前，胚胎基因和工程技术应用领域越来越大，为人类生产、生活、医疗等方面服务。

（1）胚胎工程技术实际上是在体外条件下，对_________________（两点）的一种模拟。为使供受体具有相同的生理环境，采取的措施是______________。为获得同卵双胎或多胎，采用的技术是_______，其繁殖方式是_________。

（2）基因工程中常用PCR技术扩增有关基因，PCR反应体系中需要加入dCTP、dGTP、dATP、dTTP，这四种物质的两个作用是：________和________。基因工程的核心是基因表达载体的构建，下图甲表示目的基因及限制酶切点，图乙表示质粒。操作过程中不选用的两种限制酶是______，原因是__________。

Answer

自然受精和早期胚胎发育 同期发情处理 胚胎分割 无性繁殖 原料 能量 SmaⅠ HindⅢ 限制酶SmaⅠ破坏目的基因的结构，限制酶HindⅢ必须与限制酶EcoRI或者PstI结合才能获取目的基因，这两种限制酶组合切割质粒会导致质粒的两个标记基因结构被破坏，使得重组质粒无标记基因。

【解析】

1、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。

2、PCR技术扩增目的基因

（1）原理：DNA双链复制

（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。

（1）胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作；

对供、受体母牛用激素进行同期发情处理，保证胚胎移植入相同的生理环境；来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此要获得同卵双胎或多胎的个体，则应采用胚胎分割技术；由于来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，属于无性繁殖。

（2）PCR的原理是DNA的双链复制。PCR过程中dNTP的作用是提供原料和能量；限制酶SmaⅠ破坏目的基因的结构，限制酶HindⅢ必须与限制酶EcoRI或者PstI结合才能获取目的基因，这两种限制酶组合切割质粒会导致质粒的两个标记基因结构被破坏，使得重组质粒无标记基因，所以不能选择SmaⅠ和HindⅢ这两种限制酶构建基因表达载体。