Question

科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因牛，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。

（1） 由过程①获得的A为________________________。过程②③④分别采用的是胚胎工程中的___________技术、______________技术、_______________技术。

（2）图中去掉卵母细胞的核，目的是________________________。受体应选用____________期卵母细胞。

（3） 体细胞进行体外培养时，所需气体主要有O₂和CO₂，其中CO₂的作用是____________。

（4）进行胚胎移植时，代孕母牛对移入子宫的重组胚胎基本上不发生__________________，这为重组胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。为了提高已有胚胎的利用率，可采用____________________技术。

（5）采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因牛，这是因为__________________________________。

Answer

含目的基因的表达载体 （体细胞）核移植 细胞培养 （早期）胚胎移植 保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞 MⅡ 维持培养液（基）的pH（或：酸碱度） 免疫排斥反应 胚胎分割 成纤维细胞可进行传代培养

【解析】

胚胎移植的生理基础

（1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境；

（2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能；

（3）子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能；

（4）胚胎遗传性状不受受体任何影响。

（1）要想目的基因只在乳腺组织中表达，在构建基因表达载体时，需要将人的血清白蛋白基因和乳腺组织特异性表达的启动子等调控组建重组在一起，过程①获得的A为含目的基因的表达载体，A常用显微注射法导入受体细胞。过程②③④分别采用的技术手段为（体细胞）核移植、（动物）细胞培养和胚胎移植技术。

（2）在核移植之前，必须先去掉受体卵细胞的核，目的是保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞，核移植的受体应选用处于MⅡ中期的卵母细胞。

（3）体细胞进行体外培养时，所需气体主要有O2和CO2，其中氧气是细胞代谢所必需的，而CO2的作用是维持培养液的pH。

（4）进行胚胎移植时，代孕母牛对移入子宫的重组胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。通常可采用胚胎分割技术提高已有胚胎的利用率。

（5）因为整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养，所以采用胎儿成纤维进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊。