真核生物基因中通常有内含子,而原核生物基因中没有,原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。已知在人体中基因A(有内含子)可以表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)。回答下列问题:
(1)某同学从人的基因组文库中获得了基因A,以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A,其原因是__________。
(2)若用家蚕作为表达基因A的载体,在噬菌体和昆虫病毒两种载体中,不选用_______作为载体,其原因是_________。
(3)若要高效地获得蛋白A,可选用大肠杆菌作为受体,因为与家蚕相比,大肠杆菌具有________(答出两点即可)等优点。
(4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A,可用的检测物质是________(填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”)。
(5)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献,也可以说是基因工程的先导,如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示,那么,这一启示是______________。
某种荧光蛋白(GFP)在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光,这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白(L1)基因连接在GFP基因的5′末端,获得了L1-GFP融合基因(简称为甲),并将其插入质粒P0,构建了真核表达载体P1,其部分结构和酶切位点的示意图如下,图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。
回答下列问题:
(1)据图推断,该团队在将甲插入质粒P0时,使用了两种限制酶,这两种酶是_________。使用这两种酶进行酶切是为了保证_______________,也是为了保证__________________。
(2)将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后,若在该细胞中观察到了绿色荧光,则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了________和_________过程。
(3)为了获得含有甲的牛,该团队需要做的工作包括:将能够产生绿色荧光细胞的_____________移入牛的____________中、体外培养、胚胎移植等。
(4)为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中,某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的____________(填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”)作为PCR模板。
回答下列问题:
(1)博耶(H.Boyer)和科恩(S.Coben)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达。该研究除证明了质粒可以作为载体外,还证明了___________(答出两点即可)。
(2)体外重组的质粒可通过Ca2+参与的___________方法导入大肠杆菌细胞,而体外重组的噬菌体DNA通常需与___________组装成完整的噬菌体后,才能通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞,在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中,可作为重组噬菌体宿主细胞的是___________。
(3)真核生物基因(目的基因)在大肠杆菌细胞内表达时,表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解,在实验中应选用______________________的大肠杆菌作为受体细胞,在蛋白质纯化的过程中应添加___________的抑制剂。
基因工程中可以通过PCR技术扩增目的基因。回答下列问题。
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括________和________。
(2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是________。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是________。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的________。
(3)目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是________。
下图展示了某蛋白的三级结构片段中两个氨基酸(赖氨酸和天冬氨酸)的相对位置。如果用别的氨基酸取代图中的赖氨酸,有可能会引起该蛋白的空间结构和功能的改变。
(1)图中绘出了赖氨酸和天冬氨酸的_______________基团。
(2)根据本题,可以推出蛋白质的盘曲折叠的空间结构与_____________________有直接关系。
(3)用下图中的哪种或哪几种氨基酸取代赖氨酸,对该蛋白的三级结构造成的影响最小?_________________,主要理由是________________________________________。
某同学按下表所示进行有关实验。
| 材料 | 实验试剂 | 观察内容 |
A | 浸泡过的花生种子 | 清水、苏丹III染液、50%酒精 | 细胞中着色的小颗粒 |
B | 西瓜汁液 | 斐林试剂 | 砖红色沉淀 |
C | 豆浆 | X试剂 | Y现象 |
将上述A组实验材料按表中实验条件进行相关处理后,制成临时装片放在显微镜下观察。显微镜的目镜放大倍数为10×,物镜有以下图示“10×”和“40×”两种。请回答:
(1)该同学应先用物镜______(填“①”或“②”)观察到清晰的物像后,把要放大观察的物像移至__________________,再用转换器转过物镜______(填“①”或“②”)观察。
(2)第二次观察物像的放大倍数为________倍。
(3)与第一次观察结果相比较.第二次观察到的细胞(填正确选项前字母)______。
A.大而多 B.大而少 C.小而多 D.小而少
根据观察的结果
(4)A组实验中50%酒精的作用是______________________。
(5)B组实验中的错误是________________________________________________。
(6)C组实验中的X试剂是____________________.Y现象是___________________。
(7)现有无标签的稀蛋清、葡萄糖、淀粉和淀粉酶(本质为蛋白质)溶液各一瓶,可用双缩脲试剂、斐林试剂将它们鉴定出来。请回答:
用一种试剂将上述4种溶液区分为两组,这种试剂是___________________,其中发生显色反应的一组是_____________和______________溶液,不发生显色反应的另外两种溶液可用___________试剂进一步区分。