Question

新南威尔士大学的研究人员破解了胎儿血红蛋白的“消失之谜”，掌握了重启它的“基因钥匙”，胎儿血红蛋白可以弥补成人血红蛋白的缺失，那些成人血红蛋白有缺陷的，比如镰刀状细胞贫血症患者，或许将迎来新的治疗希望。研究人员准备从胎儿血液中提取和分离血红蛋白，据图回答下列问题。

（1）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，加入柠檬酸钠的目的是__________。

（2）图1装置中C溶液是__________；用图1装置分离蛋白质的方法叫__________。

（3）在检测的样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、所带电荷的性质和数量情况如图2所示。

①将样品装入透析袋中透析12h，若分子乙保留在袋内，则分子__________也保留在袋内，其原因是__________。

②用图1装置分离样品中的蛋白质，则移动速度最慢的分子是__________；若将样品进行SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳其结果如图3所示，移动速度最慢的分子对应图中__________带（填“M”、“N”或“P”），判断理由是______________________________。

Answer

防止血液凝固 磷酸缓冲溶液 凝胶色谱法 丙和丁 透析袋是半透膜制作的，小分子物质可以通过，大分子物质不能通过，丙和丁分子都比乙大，所以也保留在袋内 甲 P 移动速度最慢的分子甲其相对分子质量最小，又因其带负电荷，在电泳中的移动速度最快，则对应P带

【解析】

血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：

（1）样品处理：①红细胞的洗涤（低速短时间离心），②血红蛋白的释放（需要加入蒸馏水和甲苯），③分离血红蛋白（中速长时间离心）。

（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析。

（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。

（4）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

（1）在采血容器中预先加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固。

（2）用图1装置分离蛋白质的方法叫凝胶色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法，分子量大的，流动快。其中装置中C溶液是磷酸缓冲溶液；

（3）①分析图乙可知，透析袋是半透膜制作的，小分子物质可以通过，大分子物质不能通过，丙和丁分子都比乙大，若分子乙保留在袋内，则分子丙、丁也保留在袋内。

②图1装置是根据相对分子质量的大小分离样品中的蛋白质，分子量大的，流动快，据图2分析可知，甲的分子量最小，最容易进入凝胶内部的通道，路程最长，移动的速度最慢；若将样品进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳其结果如图3所示，移动速度最慢的分子甲相对分子质量最小，又因其带负电荷，在电泳中的移动速度最快，则对应P带。