Question

纤维素酶在酿酒、新能源等领域被广泛应用，其关键是寻找和开发高产纤维素酶菌种及酶的固定化技术。请回答下列问题：

（1）可用固定化酶技术解决纤维素酶在工业应用中容易失活、不能再次被利用等问题，一般来说，纤维素酶的固定化更适合采用_______和物理吸附法。

（2）为筛选纤维素酶分泌型菌种，一般从____(A．石油污染的土壤  B．森林腐烂的树木 C．酿酒厂的排污口  D．生活污水)处获取样品，理由是_______。

（3）将初步筛选出的三种菌种进行发酵实验。

分别将三种菌种等量接种到含相同滤纸的液体培养基中，在30℃，150r/min的条件下培养5d，重复三次实验，用呈色反应表示液体培养基中的葡萄糖量，得到如下实验结果。

	菌种Ⅰ	菌种Ⅱ	菌种Ⅲ
颜色深浅程度	＋	＋＋	＋＋＋

实验

①该实验的原理是C₁酶、C_X酶能把纤维素分解成______，葡萄糖苷酶将其分解成葡萄糖；向培养基中加入斐林试剂，水浴加热后呈现______色。

②实验结果说明三组液体培养基中的葡萄糖量不同，请你推测产生这一差异的原因可能有哪些?_____________(要求答出两点)。

③开发这种纤维素酶的意义之一在于能为酿酒提供充足的原料，从而减少粮食的消耗，酿酒时一般将温度控制在_____℃。

Answer

化学结合（法） B 该处环境富含纤维素（纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中） 纤维二糖 砖红 三种菌种产生的纤维素酶量不同；三种菌种产生的纤维素酶活性不同；三种菌种消耗培养基中的葡萄糖的量不同 18～25

【解析】

1、固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学的方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。常用包埋法对细胞进行固定，常用化学结合法和物理吸附法对酶进行固定。

2、固定化酶优点是使酶既能与反应物接触，又能与产物分离，还可以被反复利用；固定化细胞优点是成本更低，操作更容易，可以催化一系列的化学反应。

（1）纤维素酶的固定化更适合采用化学结合法和物理吸附法。

（2）为筛选纤维素酶分泌型菌种，一般从森林腐烂的树木处获取样品；理由是该处环境富含纤维素（纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中）。

（3）①该实验的原理是C1酶、CX酶能把纤维素分解成纤维二糖；葡萄糖苷酶将其分解成葡萄糖；向培养基中加入斐林试剂，水浴加热后呈现砖红色。

②实验结果说明三组液体培养基中的葡萄糖量不同，可能是三种菌种产生的纤维素酶量不同；三种菌种产生的纤维素酶活性不同；三种菌种消耗培养基中的葡萄糖的量不同。

③酿酒时一般将温度控制在18～25℃，此温度下最适合酵母菌进行无氧呼吸。