Question

回答下列有关动物细胞培养的问题：

（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面________时，细胞会停止分裂增增殖，这种现象称为细胞的________。此时，瓶壁上形成的细胞层数是________。要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是________。

（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现________的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成________细胞，该种细胞的黏着性________，细胞膜表面糖蛋白的量________。

（3）现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是________。

Answer

相互接触 接触抑制 单层（或一层） 胰蛋白酶 衰老甚至死亡 不死性 降低 减少 活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色

【解析】

在动物细胞培养过程中，细胞会表现出接触抑制现象，此时是单层细胞。用胰蛋白酶可以使贴壁细胞从瓶壁上分离开来。随着细胞传代培养代数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡的现象，但极少数细胞可以连续增殖，有些细胞会因遗传物质改变而变成不死性细胞。由于活细胞的膜具选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，而死细胞的细胞膜丧失选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色。

（1）在动物细胞培养过程中，由于细胞有接触抑制的特性，故当贴壁细胞分裂生长到细胞表面接触时，细胞会停止分裂增增殖。此时，瓶壁上形成的细胞层数是单层（或一层）。若要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来，通常需要用胰蛋白酶处理，使其分散成单细胞悬液。

（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，并出现衰老甚至死亡的现象；但有极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成不死性细胞，即相关基因发生基因突变成为癌细胞，该种细胞的细胞膜表面糖蛋白的量减少，进而导致细胞间黏着性降低，

（3）为了鉴别细胞的死活，可用某种大分子染料，对细胞进行染色时，由于细胞膜具有选择透过性，故可根据细胞是否被染色来加以鉴别，通常死细胞由于细胞膜失去选择透过性而被染色，而活细胞因为细胞膜的选择透过性使得大分子染色剂无法进入细胞中而不被染色。