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近年来烟草叶绿体基因工程在提高光合效率、抗性和品质等方面取得了研究进展。下图是将...

近年来烟草叶绿体基因工程在提高光合效率、抗性和品质等方面取得了研究进展。下图是将拟南芥果糖16-二磷酸醛缩酶基因(简称醛缩酶基因)转人烟草叶绿体基因组的部分流程示意图,请据图同答下列问题:

1)在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是_______1中,利用PCR技术扩增拟南芥醛缩酶基因时,应选用的引物是_______

2)图2重组质粒中未标注出的必需元件还有____,构建该重组质料用的限制性核酸内切酶有_______

3)将拟南芥醛缩酶基因导人烟草叶绿体基因组时,一般将含有目的基因的质粒包裹在金粉上,通过轰击进入叶绿体中,这种方法称为_______,叶绿体基因组中存在基因区和基因间隔区,应将目的基因导入叶绿体基因组中的基因间隔区,其原因是____

4)检测目的基因是否成功导入受体细胞的方法是_______,该项技术用到的基因探针的制作方法是:在____上用放射性同位素等做标记。

 

加热至90~95℃ 引物甲、引物丙 复制原点 HindⅢ和BclI 基因枪法 避免对叶绿体自身的基因组的表达造成影响 DNA分子杂交技术 含有目的基因的DNA单链片段(或“与目的基因互补的RNA单链片段”) 【解析】 (1)目的基因的获取的方法有:从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 (2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、标记基因和复制原点等。 (3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有:农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法昰:显微注射法;将目的基因导入微生物绌胞的方法是感受态细胞法。 (4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质—抗原-抗体杂交技术个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 (1)在体外利用PCR技术扩增目的基因时,利用高温条件使模板DNA解链为单链,即加热至90~95℃条件下使模板DNA解旋,图1中,基因中两条链是反向平行的,故利用PCR技术扩增目的基因时,应该选基因上下游、方向相反的一对引物,故所选的引物是引物甲、引物丙。 (2)重组质粒应包括目的基因、启动子、终止子、标记基因和复制原点等,图2重组质粒中未标注出的必需元件还有复制原点,由图2可知,BamHI会破坏标记基因,结合图1目的基因两端的限制酶切点可判断构建该重组质粒用的限制性核酸内切酶应选择HindIII和BclI。 (3)将目的基因导入烟草叶绿体基因组时,一般将含有目的基因的质粒包裹在金粉上,通过轰击进入叶绿体中,这种方法称为基因枪法。叶绿体基因组中存在基因区和基因间隔区,为避免对叶绿体自身的基因组的表达造成影响,应将目的基因导入叶绿体基因组中的基因间隔区。 (4)检测目的基因是否成功导入受体细胞的方法是DNA分子杂交技术,在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作标记,以此作为探针。
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微生物产生的脲酶能特异性分解尿素,在农业、食品工业和污水处理中用途广泛。例如酿酒厂常用酸性脲酶去除 酒精类饮品中的尿素,以改善酒精类饮品的品质。请回答下列问题:

(1)从土壤中筛选产脲酶菌时,所配制的固体培养基应以____________为唯一氮源,从功能上分析,该培养基属于____________培养基。

(2)分离和纯化产脲酶菌常用的接种方法是____________;向培养基中加入酚红,可根据____________的大小,初步筛选出高效产脲酶菌。

(3)对同一浓度的脲酶生产菌稀释液,分别用血细胞计数板计数和稀释涂布平板法计数,若不存在实验误操作, 则前者的数量____________(填“多于”、“等于”或“小于”)后者,其原因是_______________

(4)固定脲酶时,常用交联壳聚糖和脲酶中的氨基反应成键进行固定,此方法称为____________。固定产脲酶菌时,将海藻酸钠和产脲酶菌的混合液注入CaCl2液后,若形成的凝胶珠偏大,且具有拖尾现象,可能的原因是____________;凝胶珠偏大将导致____________,使酶的作用效率下降。

 

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根据基因位于染色体上的位置,可分为伴性遗传和常染色体遗传,其中伴性遗传又分为伴X遗传(基因仅位于X染色体的非同源区段上)、伴Y遗传(基因仅位于Y染色体的非同源区段上)和同源区段遗传(基因位于XY染色体的同源区段上)。

有研究人员从世代连续培养的野生型红眼果蝇种群中分离出雌、雄各一只紫眼突变体,并进行了以下实验,请分析回答下列问题:

实验①:紫眼雌果蝇×野生型雄果蝇→F1均为红眼→F1雌雄相互交配得F2F2中红眼:紫眼=3:1

实验②:紫眼雄果蝇×野生型雌果蝇→F1均为红眼→F1雌雄相互交配得F2F2中红眼:紫眼=3:1

1)根据上述实验结果可确定果蝇眼色的遗传不可能是伴Y遗传,确定的依据是____;也可确定果蝇眼色的遗传不可能伴X遗传,确定的依据是_______

2)研究人员提出了控制果蝇眼色的基因位于XY染色体同源区段的假设(假设一)。你认为果蝇眼色基因的位置还可以提出哪一种假设_______(假设二)。

3)为了判断上述何种假设成立,需要对实验①、②的结果做进一步的观测,则支持上述假设一的观测结果是_______

4)若假设一成立,将实验①F2的雌果蝇与实验②F2:的雄果蝇随机交配,所得子代的红眼果蝇中纯合子的比例是_______

 

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种群密度是种群最基本的数量特征,而丰富度是群落中物种数目的多少,请回答种群密度和丰富度的调查相关问题。

1)在调查分布范围较小、个体较大的种群时,可以逐个计数;在多数情况下,逐个计数非常困难,需要采取估算的方法。若要调查一块农田中农作物植株上蚜虫的种群密度可采用____法,此法取样的关键是____;若要调查一块农田中某种鼠的种群密度可采用____法,鼠被捕获一次以后更难捕捉到,由此推测该调查结果与真实结果相比____(偏大/相等/偏小);若要调查农田中某种趋光性昆虫的种群密度可用_______法。

2)若要调查农田土壤中小动物类群的丰富度,常用____的方法,丰富度的统计方法通常有两种:____和目测估计法,而样方法常用的取样方法有:等距取样法和五点取样法。

3)将酵母菌接种到装有10ml液体培养基的试管中,培养一段时间后,若要测定培养液中的菌体数,可在显微镜下用_______直接计数,计数后发现,试管中该种菌的总数达到a时,种群数量不再增加。由此可知,该种群增长曲线为S型,且种群数量为时_______,种群增长速度最快。

 

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2020年春节期间,武汉市最先出现新型冠状病毒引起的肺炎传染病,之后该病在全国扩散。“万众一心战疫情”,逆行的医生进入重症病房,与时间赛跑,严防病毒入侵,穿着尿不湿,在三层帽子三层口罩两层眼镜的勒迫下长时间的工作,长时间的不进食不喝水,成为新时代可歌可泣的人。请回答下列问题:

1)长时间不进食而饥饿的医生血糖的主要来源是:_______;他们的血糖能保持相对稳定,与胰岛A细胞分泌的胰高血糖素密切相关,与正常情况相比,这些医生血液中胰岛素与胰高血糖素的比值____

2)长时间不喝水会使医生的细胞外液参透压升高,_______渗透压感受器感受刺激产生兴奋,一方面将兴奋传至大脑皮层,产生渴觉;另一方面会使垂体释放的____增加,促进肾小管和集合管重吸收水,从而使尿量_______

3)排尿过程的调节属于神经调节,神经调节的基本方式是反射,排尿反射的低级中枢位于_______,成年人可以有意识地控制排尿,说明排尿反射也受高级中枢控制,该高级中枢位于_______

4)新型肺炎冠状病毒入侵机体后,能选择性的入侵肺部细胞,说明它能够_______肺部细胞表面受体。

5)某患者在初次感染时,14天后检测到了该病毒的抗体,再次感染时,第2天时就检测到了该抗体,请简要解释再次感染时,该抗体迅速产生的原因是____

 

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叶绿体基质是进行光合作用暗反应的场所,它含有还原C3与合成淀粉的全部酶系。叶绿体进行暗反应的中间产物磷酸丙糖的代谢途径如图所示。

请回答下列问题:

1)磷酸丙糖从叶绿体输出的同时伴随着无机磷(Pi)进入叶绿体,当无机磷缺乏时,磷酸丙糖从叶绿体中输出_______(增多/减少),在生产上可以采取________措施增加蔗糖的合成,从而使果实更甜。

2)叶绿体中产生ATP的场所是_______

3)研究表明,TPT(载体蛋白)活性是限制光合速率大小的重要因素,CO2充足时,TPT活性降低,磷酸丙糖从叶绿体输出受阻,淀粉合成增多。由此推测生产上可采取_______措施来提高小麦淀粉产量。

4)某同学从资料中看到“生长素可以影响玉米叶片和果穗中的蔗糖分配”,请简要写出验证该结论的实验思路______________

 

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