Question

某学校研究性学习小组了解到泡菜中的乳酸菌除了在发酵中产生乳酸，还可以降解亚硝酸盐，该学校研究性学习小组利用泡菜液进行了相关的研究，请回答下列问题：

（1）乳酸菌和酵母菌在结构上的主要区别是_______________。

（2）学习小组用改良的MRS固体培养基分离乳酸菌，该培养基成分如下：

蛋白陈	牛肉膏	酵母膏	葡萄糖		琼脂	蒸馏水	其他成分略
10g	10g	10g	20g	20g	20g	1000ml

①该培养基因含碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，从而在菌落周围形成溶钙圈，该培养基属于______________（填“选择”或“鉴别”）培养基。

②分离乳酸菌需配制以上培养基，图①所示操作之前，应对培养基进行的正确操作是__________。

③某小组采用图②所示接种的方法____________，接种后的平板在培养时的放置应如图________（选填“a”或“b”）所示。这样放置的原因有_________。

A．防止水分过快蒸发，导致培养基干裂    B．防止皿盖上的冷凝水滴落，造成培养基污染

C．有利于观察计数，辨别菌落特征    D．移动培养皿时，不容易造成皿盖打开而暴露培养基

（3）另一小组将泡菜液进行梯度稀释后，取0.1ml加入到50℃左右的培养基中摇匀，待凝固后，再在其上加盖一层透明的固体培养基，在50℃左右操作的原因是________，加盖一层透明的固体培养基的目的是_________。

①在恒温培养箱中培养72h后，挑取溶钙圈较大的菌落，用平板划线法进行进一步纯化，下图是接种培养后的菌落分布图，对应的平板划线操作示意图为_____________________。

       

②乳酸菌在温度为________的冷冻箱中长期保存时，需要加入一定量的_______。

Answer

乳酸菌没有以核膜为界限细胞核 鉴别 灭菌 稀释涂布平板法 a ABCD 此时培养基为液态且不烫手 隔绝空气（氧气），确保无氧环境 丙 -20℃ 甘油

【解析】

本题结合图表，考查微生物的分离和培养，要求考生识记接种微生物常用的两种方法；识记培养基的种类及功能；识记保存菌种的方法等，能结合所学的知识准确答题。

（1）乳酸菌属于原核生物，酵母菌属于真核生物，原核细胞和真核细胞在结构上的主要区别是原核细胞无以核膜为界限细胞核。

（2）①该培养基因含碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，从而在菌落周围形成溶钙圈，该培养基属于鉴别培养基。

②分离乳酸菌需配制以上培养基，图①倒平板操作之前，应对培养基进行的是高压蒸汽灭菌。

③某小组采用图②所示接种的方法稀释涂布平板法，接种后的平板在培养时的放置应如图a倒置放置，原因是防止水分过快蒸发，导致培养基干裂；防止皿盖上的冷凝水滴落，造成培养基污染；有利于观察计数，辨别菌落特征；移动培养皿时，不容易造成皿盖打开而暴露培养基等，故选ABCD。

（3）小组成员将泡菜液进行梯度稀释后，取0.1ml加入到50℃左右的培养基中摇匀，待凝固后，再在其上加盖一层固体培养基。在50℃左右操作的原因是此时培养基为液态且不烫手，加盖一层固体培养基的目的是隔绝空气（氧气），确保无氧环境。

①使用平板划线法时，在进行第二次以及其后的划线操作时要从上一次划线的末端开始划线，如图丙所示。

②长期保存菌种应该用甘油管藏法，因此乳酸菌在-20℃的冷冻箱中长期保存时，需要加入一定量的甘油。