Question

（生物-选修3:现代生物科技专题）

胚胎工程和基因工程目前在生物技术中发展较快，回答下列问题：

（1）在哺乳动物的核移植实验中，一般通过_________（物理方法）将受体细胞激活，使其进行细胞分裂并发育，当胚胎发育到_________阶段时，将胚胎植入另一雌性（代孕）动物体内。

（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行_________处理。另外，培养的卵母细胞需要发育至_________，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和第一极体。

（3）利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞进行核移植的原因是__________________。

（4）若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、_________、终止子、标记基因和复制原点等。目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的_________（填“受精卵”或“乳腺细胞”），导入方法是__________________。

Answer

电脉冲（或电刺激） 桑椹胚或囊胚 获能 MII中期（减数分裂第二次分裂中期） 体细胞分化程度高，不容易恢复全能性 人干扰素基因（或目的基因） 受精卵 显微注射法

【解析】

（1）在哺乳动物的核转移实验中，一般通过电脉冲（或电刺激）（物理方法）将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到桑椹胚或囊胚阶段时，将胚胎移入受体（代孕）动物体内；

（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行体外获能处理。另外，培养的卵母细胞需要发育至MII中期（减数分裂第二次分裂中期）才有受精能力，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和第一极体；

（3）核移植分为体细胞核移植和胚胎细胞核移植，但体细胞分化程度高不易恢复全能性，所以利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞进行核移植；

（4）若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则构建基因表达载体时，需要将人干扰素基因与牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件连接在一起，然后采用显微注射的方法将重组DNA导入牛受精卵中，经胚胎早期培养一段时间后移植入母体内发育成熟，即可获得能产生干扰素的转基因牛，其中构建的基因表达载体应该包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、人干扰素基因（或目的基因）、终止子、标记基因等四部分。