满分5 > 高中生物试题 >

乙烯具有促进果实成熟的作用,ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的两个关...

乙烯具有促进果实成熟的作用,ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的两个关键酶。利用反义DNA技术(原理如图1),可以抑制这两个基因的表达,从而使番茄具有耐储存、宜运输的优点。图2为融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反义表达载体的结构示意图。

1)图2中的2A11为特异性启动子,则2A11应在番茄的 ____________(器官)中表达。

2)从番茄成熟果实中提取 ___________为模板,利用反转录法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因,以进行拼接构成融合基因并扩增。

3)合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点,ACC合成酶基因两端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位点,用限制酶____________对上述两个基因进行酶切,再串联成融合基因,相应的Ti质粒应用限制酶 _______________进行切割,确保融合基因能够插入载体中。

4)为了实现图1中反义基因的效果,应将融合基因 _______(正向/反向)插入在启动子 2A11 的下游即可构成反义融合基因。将表达载体与农杆菌菌液混合后,接种在含有___的培养基中,可筛选出含有反义融合基因的农杆菌,再利用农杆菌转化法获得转基因番茄。

5)在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时,____________(填“能”/“不能”)用放射性物质标记的ACC氧化(合成)酶基因片段做探针进行检测,理由是____________

 

果实 RNA Xbal BamHl和Sacl 反向 卡那霉素 不能 番茄细胞内本来存在ACC合成酶基因,能与ACC合成酶基因探针发生分子杂交 【解析】 分析题意和题图:番茄细胞中原有靶基因控制合成的ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的两个关键酶。图1所示为反义基因转录成的RNA可与靶基因转录出的mRNA形成RNA双链,使靶mRNA不能与核糖体结合或被RNA酶降解,从而阻止了ACC氧化酶和ACC合成酶的合成,影响细胞中乙烯的合成,使番茄具有耐储存、宜运输的优点。图2所示的基因表达载体的组成包括复制原点、启动子、终止子、标记基因和目的基因,目的基因插入点在启动子和终止子之间。 (1)乙烯具有促进果实成熟的作用,因此图2中的2A11为特异性启动子,则2A11应在番茄的果实中表达。 (2)从番茄成熟果实中提取RNA为模板,利用反转录法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因,以进行拼接构成融合基因并扩增。 (3)合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点,ACC合成酶基因两端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位点,要将两个基因融合,需用同一种限制酶即XbaⅠ酶对上述两个基因进行酶切,再用DNA连接酶串联成融合基因,这样融合基因上有三个限制酶切点:BamHⅠ、XbaⅠ、SacⅠ,其中限制酶BamHⅠ、SacⅠ分别位于融合基因的两端,因此相应的Ti质粒应用限制酶BamHl和Sacl进行切割,确保融合基因能够插入载体中。 (4)反义融合基因是由番茄果实细胞中的靶基因转录出的mRNA反转录形成的,因此为了实现图1中反义基因的效果,应将融合基因反向插入在启动子 2A11 的下游即可构成反义融合基因。将表达载体与农杆菌菌液混合后,接种在含有卡那霉素的培养基中,可筛选出含有反义融合基因的农杆菌,再利用农杆菌转化法获得转基因番茄。 (5)在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时,因为番茄细胞内本来存在ACC合成酶基因,能与ACC合成酶基因探针发生分子杂交,所以不能用放射性物质标记的ACC氧化(合成)酶基因片段做探针进行检测。
复制答案
考点分析:
相关试题推荐

阅读下列有关病毒的材料并回答题目。

Ⅰ.2019新型冠状病毒,即“2019-nCoV”,为有包膜病毒。颗粒呈圆形或椭圆形,直径50200nm。颗粒表面有棒状突起,使病毒表面看起来形如花冠,故而得名。2019-nCoV基因组长度为298Kb,为单股正链RNA,其5’端为甲基化帽子,3’端有多聚腺苷酸(PolyA)结构,可直接作为翻译模板。截至2020325日上午10时,世界范围确诊感染此病毒的人数已累计达到412461人。

1)下列选项错误的是_____

A.细胞膜能控制物质进出,故该病毒只能侵染受损细胞,使人患病

B.由于没有核糖体,这种病毒无法合成蛋白质,其包膜组成一定不含蛋白质

C.病毒的遗传物质水解后可产生一分子核苷,一分子含氮碱基与一分子磷酸

D.此病毒的单股正链RNA,只有转录形成对应的负链RNA才能附着在细胞的核糖体上

2)这种病毒的遗传物质为_____,研究人员紧急研发了核酸检测试剂盒,以此来检测病毒,检测此病毒的核酸可使用_______法。研究人员发现,病毒的中间宿主为蝙蝠,某些情况下,病毒可在不同动物身体内翻译出基本相同的多肽链,这是因为_____

3)病毒入侵人体后,引起相关细胞分泌抗体,该抗体并不会与其他病症的抗原结合,这体现了________,此原理也可应用于该病的检测。若要用细胞工程的方法生产针对2019-nCoV上抗原的单克隆抗体,用到的技术有__________________

4)将2019-nCoV不稳定的RNA转换成DNA后,技术人员常采用荧光定量PCR技术定量检测样本中病毒的核酸含量。其原理如图:在PCR反应体系中每加入一对引物的同时,加入一个与某条模板链互补的荧光探针,当_________催化子链延伸至探针处,会水解探针,使荧光监测系统接受到荧光信号,即每扩增一次,就有一个荧光分子生成。反应最终的荧光强度与PCR起始状态_________含量呈正相关。

Ⅱ.朊病毒是一种只含蛋白质而不含核酸的病原微生物。按图示1→2→3→4进行实验,验证朊病毒侵染因子是蛋白质,题中所用牛脑组织细胞为无任何标记的活体细胞。

1)本实验采用的研究方法是______

2)从理论上讲,经1→2→3→4实验离心后上清液中______(填“能大量”或“几乎不能”)检测到32P,沉淀物中___________(填“能大量”或“几乎不能”)检测到32P,出现上述结果的原因是:_________

3)如果添加试管5,从试管2中提取朊病毒后先加入试管5同时添加35S标记的(NH4235SO4,连续培养一段时间后,再提取朊病毒加入试管3,培养适宜时间后离心,检测放射性应主要位于_______中,少量位于_______中,原因是:_____________

4)一般病毒的增殖同朊病毒之间的最主要区别是:一般的病毒侵染细胞是向宿主细胞提供________(物质),利用宿主细胞的_______________等物质进行增殖。

 

查看答案

研究证实ATP既是“能量通货”,也可作为神经细胞间信息传递中的一种信号分子,其作为信号分子的作用机理如下图所示。请分析回答:

1)神经细胞中的ATP主要来自细胞呼吸,其结构简式是___________。正常成年人安静状态下24小时有40kgATP发生转化,而细胞内ADPATP的浓度仅为210mmol/L,为满足能量需要,人体解决这一矛盾的合理途径是__________

2)由图可知,细胞间隙中的ATP在有关酶的作用下,磷酸基团逐个脱离下来。最后剩下的是___________

3)一些神经细胞不仅能释放典型神经递质,还能释放ATP,两者均能引起受体细胞的膜电位变化。据图分析,科学家当初推测“ATP可作为神经细胞间传递信息的信号分子”的实验思路是:①科学家用化学物质阻断__________后,发现靶细胞膜能接受到部分神经信号;②科学家寻找到靶细胞膜上有ATP____________

4)为了研究X物质对动物细胞的影响,某研究小组用不同浓度的X物质将细胞处理24小时。然后测量各组细胞内ATP的浓度和细胞死亡的百分率,经过多次实验,所得数据如下表所示:

实验编号

X物质浓度(ng •mL-1

细胞内ATP浓度(nmoL •mL-1

细胞死亡百分率

A

0

80

1

B

2

70

3

C

4

50

10

D

8

20

25

E

16

5

70

 

 

 

①实验的因变量是____________

②实验数据表明,该实验因变量之间的联系是____________

③若用混有浓度为2ng •mL-1X物质的饲料饲喂大鼠,其小肠的消化和吸收功能受到抑制的主要原因是:阻碍消化酶的_______,影响消化;妨碍______,影响营养物质的吸收。

 

查看答案

如图中的甲、乙、丙分别代表人体液中物质交换、食物网中能量流动、生态系统碳循环的示意图。据此,下列说法中正确的是(   

       

A.甲图DB间不能直接进行物质交换,DA之间才能直接进行物质交换

B.因捕食关系而建立的食物链中,能量最少的是丙图中的B所处的营养级

C.从研究内容来看,甲属于生命系统的个体水平,乙、丙都属于群落水平

D.能量传递效率按10%计算,乙图中B取食A占的比例由1/2调整为5/6,则A供养的B数量是原来的22

 

查看答案

克里斯琴认为:种群数量上升时,种内个体间的社群压力会影响种群数量,其调节机制如下图所示,以下说法不正确的是(   

A.社群压力会导致浆细胞分泌的抗体数量减少

B.社群压力会导致机体胰岛B细胞分泌的胰岛素增多

C.社群压力通过神经、体液、免疫三种调节方式调控种群数量

D.社群压力会导致出生率升高,死亡率下降,从而改变种群数量

 

查看答案

目前,对种子萌发和休眠的调控机理目前尚无定论。最能被接受的是KhanWaters提的“植物激素三因子”假说,其模型如图所示。GACKABA分别是赤霉素、细胞分裂素和脱落酸下列相关分析错误的是(   

“+”表示激素存在生理活性浓度;“-”表示激素不存在生理活性浓度

A.根据实验结果可初步判断,种子的休眠和萌发是多种植物激素调节的结果

B.36组对照的自变量是有无GA,而CKABA都是无关变量

C.据第5678组可知,不管CKABA是否存在生理活性浓度,若GA不存在生理活性浓度,种子都处于休眠状态

D.综合8组实验结果,ABAGA作用的发挥起到促进作用,CK是种子萌发的必要激素

 

查看答案
试题属性

Copyright @ 2008-2019 满分5 学习网 ManFen5.COM. All Rights Reserved.