Question

测定水样是否符合饮用水卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。流程如图所示，滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红美蓝的培养基（EMB培养基）上培养→统计菌落数目。据图回答问题：

（1）过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要进行灭菌处理的是________。与过滤有关的操作都要在________________进行。

（2）将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，这属于微生物培养中的________操作，从物理状态角度分析，EMB培养基属于________培养基。

（3）某生物兴趣小组的某同学尝试按照上述方法进行测定，无菌操作下将10ml待测水样加入到90ml无菌水中，稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数平均为124，黑色菌落数平均为31，则推测1升待测水样中的大肠杆菌数目为________个。

（4）该同学进一步思考，利用滤膜法也可能用于测定待测水样中其他微生物的数目。他取了两份水样，一份待测水样来自变酸的果酒，从中检测到两种微生物，它们在结构上的主要区别是________，另一份来自昌源河，若要通过测量蓝藻的数目来研究水华，应更换上述过滤装置中的滤膜，为了减少细菌的干扰，应选择孔径________（填“更小”或“不变”或“更大”）的滤膜。

Answer

滤杯、滤膜和滤瓶 酒精灯火焰旁 接种 固体 3100 有无成形的细胞核 更大

【解析】

滤膜法是检测水样中大肠细菌群的方法，将一定量水样注入已灭菌的微孔薄膜的滤器中，经过抽滤，细菌被截留在滤膜上，将滤膜贴于伊红-美蓝培养基上，经培养后计数和鉴定滤膜上生长的大肠菌群菌落即可推测计算出水样中的大肠杆菌数；伊红为酸性染料，美蓝为碱性染料，大肠杆菌在伊红-美蓝培养基的菌落呈深紫色，并有金属光泽。

（1）过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，三者都需要进行灭菌处理；为了防止杂菌的污染，与过滤有关的操作都要在酒精灯火焰旁进行。

（2）将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，这属于微生物培养中的接种操作；从物理状态角度分析，EMB培养基属于固体培养基。

（3）根据题意分析，10ml待测水样经过稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数平均为124，黑色菌落数平均为31，其中黑色菌落为大肠杆菌，则推测1升待测水样中的大肠杆菌数目=31÷10×1000=3100个。

（4）变酸的果酒中存在酵母菌和醋酸菌两种微生物，分别属于真核生物和原核生物，两者在结构上的主要区别是有无成形的细胞核；若要通过测量蓝藻的数目来研究水华，应更换上述过滤装置中的滤膜，由于单个蓝藻细胞的直径比细菌细胞的大，为了减少细菌的干扰，应选择孔径更大的滤膜。