Question

青枯菌可从根部伤口侵入番茄植株，导致番茄患青枯病，进而引起植株萎蔫枯死。请回答下列问题：

（1）培养基的配制：取适量的马铃薯去皮切块，加水煮沸后，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和___________，采用_________方法灭菌，倒平板后得到固体培养基。培养基中的营养物质除碳源外还有_________________（答出两点即可）。

（2）制作细菌悬液：从病株样品中剪取侧根，经清水冲净后置于0．1%的升汞液中消毒片刻，目的是_______________，然后用_______________漂洗，除去多余升汞液，将其充分研磨后制成悬液。

（3）青枯菌的分离与鉴定：将少量悬液滴于培养基上，用_______（工具）将样液均匀涂布在培养基的表面，观察所得单菌落的特征。利用不同微生物在固体培养基上的________（答出两点即可）等菌落特征可以区分不同类型的微生物。

（4）用上述方法测定青枯菌密度，实际活菌数多于所测数值，因为____________________。

Answer

琼脂 高压蒸汽 氮源、水和无机盐 除去（杀死）根表杂菌 无菌水 涂布器 形状、大小、隆起程度、颜色 当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察的是一个菌落

【解析】

琼脂一般当作制备固体培养基的凝固剂，微生物在生长的时候需要提供水、碳源、氮源和无机盐等基本的营养物质。本题综合考查微生物的实验室培养的有关知识，要求学生识记培养基的成分，掌握选择培养基配制的原则等。

（1）琼脂是凝固剂，在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后进行高压燕汽灭菌，最终得到固体培养基；所以一般对培养基的灭菌方法采用高压蒸汽灭菌法；培养基中的营养物质类型除碳源外还有氮源、水和无机盐；

（2）升汞液消毒的目的是除去根表杂菌；立即用无菌水漂洗的目的是除去多余升汞液。

（3）涂布时所用的工具是涂布器；根据不同微生物在固体培养基上菌落的形状、大小、隆起程度、颜色等特征可以区分不同的微生物；

（4）当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的是一个菌落，因此稀释涂布平板法测定目的菌的密度，实际活菌数量要比测得的菌落数量多。