Question

黑茶常被压缩为茯砖茶，其内的金黄色菌落俗称“金花”，主要是冠突散囊菌，其内含丰富的营养素，对人体极为有益。回答下列问题：

（1）为分离茯砖茶中的冠突散囊菌，制备马铃薯琼脂培养基→无菌水浸泡黑茶30min过滤获得菌液→取0．2mL稀释液接种在培养基平板上，在适宜条件下培养一段时间观察菌落形态并计数。由培养基的配方可知，冠突散囊菌属于______________（填“细菌”、“真菌”或“放线菌”）。若采用稀释涂布平板法，应先做系列稀释再涂布培养，确保以10倍等梯度稀释的操作是每次均从上一个稀释倍数的试管中取1mL菌液，再加入______________中进行稀释，移液管使用过程中的无菌操作有______________（答出两点即可）。

（2）冠突散囊菌能分泌淀粉酶催化茶叶中的淀粉转化低聚糖，也能分泌氧化酶催化多酚类化合物氧化，使茶叶汤色变棕红，消除粗青味。酶催化作用的机理是_______________；欲将多种相对分子质量不同的酶进行分离，可用______________法；淀粉酶适合采用______________法固定化技术生产麦芽糖浆；若要模拟冠突散囊菌分解茶汤中的成分，应该采用固定化细胞技术而非固定化酶，理由是固定化细胞能____________，使冠突散囊菌能发生连续的酶反应，分解茶汤中的成分。

Answer

真菌 9mL无菌水 移液管需要灭菌；操作时在酒精灯火焰旁进行；转移菌液等操作不能接触任何物体 显著降低反应需要的活化能 凝胶色谱法 化学结合和物理吸附 固定一系列酶

【解析】

牛肉膏蛋白胨培养基适于培养细菌、麦芽汁琼脂培养基适于培养酵母菌、马铃薯琼脂培养基适于培养真菌等，真菌能够大量生成淀粉水解酶，利用培养基中的淀粉。

固定化酶、固定化细胞的比较：

（1）马铃薯葡萄糖琼脂培养基一般用于真菌培养，故冠突散囊菌属于真菌，稀释涂布平板法在稀释菌液时，一般用无菌水稀释，，确保以10倍等梯度稀释，则需要加入1mL菌液，再加入9mL无菌水稀释，涉及到的无菌操作包括移液管需要灭菌；操作时在酒精灯火焰旁进行；转移菌液等操作不能接触任何物体等；

（2）酶催化作用的机理显著降低反应需要的活化能，分离不同相对分子质量的酶可以采用凝胶色谱法，由于酶分子较小，容易从包埋材料中漏出，因此酶更适合采用化学结合法和物理吸附固定法，固定化细胞可以催化一系列的酶促反应，有利于冠突散囊菌分解茶汤中的成分。