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白细胞介素是人体重要的淋巴因子,具有免疫调节、抑制肿瘤等多种功能。近年来科学家将...

白细胞介素是人体重要的淋巴因子,具有免疫调节、抑制肿瘤等多种功能。近年来科学家将药用蛋白转向植物生产,如图是将人的白细胞介素基因导入马铃薯中,培养生产白细胞介素的过程。(tsr为一种抗生素—硫链丝菌素的抗性基因)

1)提取人的白细胞介素基因适宜选用的限制酶是___________,不能使用限制酶SmaI的原因是___________

2)除图示方法外,也可从利用___________法构建的cDNA文库中获取目的基因。获得目的基因后可采用PCR技术大量扩增,需提供Taq酶和___________等。

3)将目的基因导入马铃薯细胞常采用___________法,其原理是将目的基因导入Ti质粒上的___________

4)为筛选出含目的基因的马铃薯细胞,需要在培养基中添加___________。最终为了检测目的基因是否在马铃薯中表达,可通过____________方法进行分子水平的检测。

 

PstⅠ和HindⅢ 限制酶SmaⅠ酶切位点位于白细胞介素基因中部,使用它会造成目的基因断裂 反转录 引物 农杆菌转化 T-DNA 硫链丝菌素 抗原—抗体杂交 【解析】 分析题图,图示表示人的白细胞介素基因表达载体的构建过程,载体和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位点,所以切割载体和目的基因时用限制酶PstⅠ和HindⅢ,再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组载体。获取目的基因的方法包括从基因文库中获取、cDNA文库法、供体细胞的DNA中直接分离基因(鸟枪法)。农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后,可将Ti质粒的T-DNA插入到植物基因组中。 (1)载体和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位点,使用限制酶SmaI则会破坏目的基因; (2)目的基因的获取可以采用cDNA文库法(即逆转录法),指以某生物成熟mRNA为模板逆转录而成的cDNA序列的重组DNA群体,采用PCR技术大量扩增,需提供Taq酶和引物等; (3)将目的基因导入植物细胞常采用农杆菌转化法,利用的是Ti质粒上的T-DNA; (4)构建好的表达载体含有硫链丝菌素的抗性基因,因此可以在培养基中添加硫链丝菌素进行筛选,为检测目的基因是否顺利表达,可以通过抗原-抗体杂交技术。
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考点分析:
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黑茶常被压缩为茯砖茶,其内的金黄色菌落俗称“金花”,主要是冠突散囊菌,其内含丰富的营养素,对人体极为有益。回答下列问题:

1)为分离茯砖茶中的冠突散囊菌,制备马铃薯琼脂培养基→无菌水浸泡黑茶30min过滤获得菌液→取02mL稀释液接种在培养基平板上,在适宜条件下培养一段时间观察菌落形态并计数。由培养基的配方可知,冠突散囊菌属于______________(填“细菌”、“真菌”或“放线菌”)。若采用稀释涂布平板法,应先做系列稀释再涂布培养,确保以10倍等梯度稀释的操作是每次均从上一个稀释倍数的试管中取1mL菌液,再加入______________中进行稀释,移液管使用过程中的无菌操作有______________(答出两点即可)。

2)冠突散囊菌能分泌淀粉酶催化茶叶中的淀粉转化低聚糖,也能分泌氧化酶催化多酚类化合物氧化,使茶叶汤色变棕红,消除粗青味。酶催化作用的机理是_______________;欲将多种相对分子质量不同的酶进行分离,可用______________法;淀粉酶适合采用______________法固定化技术生产麦芽糖浆;若要模拟冠突散囊菌分解茶汤中的成分,应该采用固定化细胞技术而非固定化酶,理由是固定化细胞能____________,使冠突散囊菌能发生连续的酶反应,分解茶汤中的成分。

 

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果蝇的灰身和黑身是一对相对性状,由常染色体上的A/a控制。现让多只灰身果蝇随机交配,F1中灰身:黑身=559,无致死现象且雌雄情况相同。回答下列问题:

1)这对性状中___________是显性性状,原因是_______________________

2)在F1中灰身:黑身不满足分离比31,原因是______________________,亲本中a的基因频率为______________________

3)已知果蝇的另一对相对性状正常腿与短腿由X染色体上的B/b基因控制,已知受精卵中缺少该对等位基因中的某一种基因时会致死。现有正常腿雌果蝇与短腿雄果蝇交配,得到大量的F1代且雌:雄=21。根据实验结果,能得出的结论有___________(答出两点即可)。

 

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池塘养鱼历史悠久,鱼的种类丰富,食性多样:有素食性的鱼类,如草鱼、鲢鱼、鳙鱼,有肉食性的鱼类,如青鱼、鲶鱼等。回答下列问题:

1)养殖品种上最好选择___________(填食性)鱼类,以期获得最大产量。

2)如果给池塘补充投放饲料,池塘的环境容纳量(K值)将___________(填“增大”、“不变”或“减小”),从生产者到素食性鱼类的能量传递效率将_______(填“增大”、“不变”或“减小”)。

3)要确保持续高产,应在种群数量___________(填“小于”、“等于”或“大于”)K/2时捕捞。

4)在池塘水体中的某一水深处取水样,将水样分成三等份,一份直接测定O2含量(A);另两份分别装入不透光(甲)和透光(乙)的两个玻璃瓶中,密闭后放回取样处,经过24小时后测定甲瓶中的O2含量为B,乙瓶中的O2含量为C。假设甲、乙瓶中生物呼吸作用相同,完善有关问题:

①写出能间接表示该水层太阳能输入总量的表达式___________(用字母表示);

②据此分析,池塘水层过深不利于养鱼的原因是____________(答出两点即可)。

 

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近年来研究表明,通过重新编码人体胰岛中的胰岛A细胞或胰岛γ细胞,可以产生胰岛素。研究团队将两种关键转录基因(Pdx1MafA)植入糖尿病小鼠的胰岛A细胞和γ细胞,然后将这些成功编码的细胞移植入糖尿病小鼠体内,结果发现小鼠胰岛素分泌量和血糖水平均在一段时间内处于正常化。回答下列相关问题:

1)胰岛分化为A细胞、B细胞、γ细胞等多种细胞,它们的遗传物质___________(填“相同”、“不同”或“不完全相同”)。胰岛素能作用于靶细胞膜上的_______,激素调节的特点有___________(答出两点即可)。

2)据图曲线分析,实验研究中还应设置一组对照组。应选择___________的小鼠进行实验,测定实验中血糖的数值。

3)血糖升高后会促进两种关键基因(Pdx1MafA)的表达,促进胰岛素的合成,当血糖明显降低时,这两种基因的表达减弱或关闭。这种调节机制的意义是____________

4)结合图实验结果,初步确定植入关键基因细胞的糖尿病小鼠,其病症在一定程度上能得到缓解,但并不能治愈。作出此判断的依据是_______________________

 

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下图是中心法则及其发展图解,反映了生物体内遗传信息的流向,回答下列问题:

1)在线粒体和叶绿体中能够发生的生理过程有________(填序号),④过程需要的一种特殊的酶是_______

2)与③过程相比较,②过程特有的碱基配对方式是________

3)若某基因编码的氨基酸序列为“色氨酸—苯丙氨酸—……—.丝氨酸—半胱氨酸”,根据该氨基酸序列及密码子表________(填“能”或“不能”)推测出该基因的碱基序列,理由是________________

 

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