Question

某研究小组研究了果胶酶添加对蓝莓出汁率的影响实验。回答下列问题。

（1）为了筛选出能分泌较多果胶酶的微生物，一般需用_________的培养基进行选择培养。首先通过单菌落分离，获得需要的菌株；然后将其_________，并进行特性鉴定，筛选得到高产菌株。该过程所用培养基对于酸碱度的要求是_____。

（2）市售蓝莓汁（含葡萄糖）在制作过程中要进行灭菌，为防止葡萄糖分解碳化，要用 500g/cm²压力（90℃以上），灭菌30分钟。该小组在获得蓝莓汁后，欲进一步制作蓝莓酒。若发酵瓶内三天后还看不到气泡冒出，则必须_____，使发酵作用尽快发生。

（3）在适宜的温度和pH下，研究小组利用一定量的蓝莓汁和适宜浓度的果胶酶溶液探究果胶酶的最适用量，实验结果如图所示。写出该实验失误可能的原因及改进方法分别是 _________、__________。

（4）工业生产中，有时会采用不溶于水的介质对果胶酶进行_________处理，使酶在一定空间范围内发挥作用。与传统使用果胶酶相比，该处理的优点是__________（答出两点即可）。

Answer

以果胶为唯一碳源 扩大培养 中性偏酸 加入更多的酵母 果胶酶用量不合理 减少果胶酶的用量 固定化 可重复使用、可回收；便于产物分离；提高产品纯度等

【解析】

1.微生物分离过程中的关键步骤是无菌技术，防止外来杂菌的污染；对于培养基应该进行高压蒸汽灭菌，彻底杀灭包括芽孢在内的一切微生物，检验培养基灭菌是否彻底的方法是对不接种菌种的空白培养基进行培养，看是否会长出菌落。实验结束时应该将使用过的培养基进行灭菌处理才能倒掉，防止污染环境。

2.果胶会影响出汁率，还会使得果汁浑浊，果胶酶能分解果胶，瓦解植物细胞壁以及胞间层，使得榨取果汁更容易，而且使得果汁变得澄清。

3. 分析题图：随着时间的推移，实验组果汁体积不发生改变，说明实验失误的原因不是酶促反应时间；提高果胶酶溶液体积，果汁体积并没有增加，说明果胶酶用量不合理，应该减少用量；从图中无法看出苹果汁的用量、果胶酶体积梯度对实验结果的影响。

（1）为了筛选出能分泌较多果胶酶的微生物，一般需用果胶为唯一的碳源的培养基进行选择培养。首先通过单菌落分离，获得需要的菌株；然后将其扩大培养，并进行特性鉴定，筛选得到高产菌株。该过程所用培养基对于酸碱度的要求是中性偏酸。

（2）市售蓝莓汁(含葡萄糖)在制作过程中要进行灭菌，主要是防止微生物将葡萄糖分解碳化。该小组在获得蓝莓汁后，欲进一步制作蓝莓酒。若发酵瓶内三天后还看不到气泡冒出，则必须加入更多酵母菌，使发酵作用尽快发生。

（3）根据以上分析可知，果胶酶浓度对果汁体积没有影响，说明果胶酶用量不合理，应该减少用量，如稀释果胶酶溶液后再一次进行实验。

（4）工业生产中，有时会采用不溶于水的介质对果胶酶进行固定化处理，使酶在一定空间范围内发挥作用。与传统使用果胶酶相比，该处理的优点是可重复使用、可回收；便于产物分离；提高产品纯度等。