Question

回答下列（一）、（二）小题

（一）回答有关微生物培养和筛选的问题

空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板（培养基）收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：

①配制培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H₂O）；

②制作无菌平板（培养基）；

③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；

④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。

请回答下列问题：

（1）该培养基中微生物所需的氮源是____________________，成分X通常是________________。

（2）步骤③中，实验组的操作是将不同平板分别置于教室中的_______________，敞口静置一段时间。

（3）若在某次调查中，某一高度实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中培养基出现了___________现象。若要筛选出空气中的真菌，应加入__________________。

（二）从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，实验过程如图所示，请回答下列问题：

（1）图中物质A为_____________，B过程为___________。

（2）欲要统计每克土壤样品中含________的细菌数目，宜采用_______________法接种到尿素培养基上。对照组配制的培养基为________________培养基。将相同浓度的土壤稀释液分别接种在实验组和对照组培养基上，在37℃的_______________培养24-48h，观察比较____________。

（3）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择__________________的培养基，并在________条件下培养。

Answer

牛肉膏和蛋白胨 琼脂 不同高度 杂菌污染 抗生素 无菌水 稀释 脲酶 涂布分离 LB全营养（固体） 恒温培养箱 菌落数 以淀粉为唯一碳源 高温

【解析】

微生物培养基一般都含有水、碳源、氨源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。

（一）（1）牛肉膏和蛋白胨都含有蛋白质的水解产物，都可以作为氮源；平板为固体培养基，故需要加入琼脂。

（2）实验探究的是教室内不同高度空气中微生物的分布，其中自变量为不同高度，故需在不同高度下放置开盖平板。

（3）在完全正确的操作情况下，空白对照组中不应出现菌落。若出现菌落，说明操作过程中存在杂菌污染，属于实验失误，所有实验数据均不应采用。若要筛选出空气中的真菌，应加入抗生素。

（二）（1）从土壤中分离以尿素为氮源的细菌的实验流程：土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定。故图中物质A为无菌水，B过程为稀释过程。

（2）欲要统计每克土壤样品中含脲酶的细菌数目，宜采用涂布分离法接种到尿素培养基上。对照组配制的培养基为LB全营养（固体）培养基。将相同浓度的土壤稀释液分别接种在实验组和对照组培养基上，在37℃的恒温培养箱培养24-48h，观察比较菌落数。

（3）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择以淀粉为唯一碳源的培养基，并在高温条件下培养。